1樓:
儲存得當的話,一抗工作液可重複利用2-3次一般不影響效果,但也不絕對,主要是看你的抗體本身如何,如果第一次做出來效果就不理想就不提倡這麼做了。二抗還是算了吧!那麼便宜,扔了不可惜。
westernblot的一抗和二抗都可以用多克隆抗體嗎
2樓:匿名使用者
western blot的一抗和二抗都
來可以用多克隆
源抗體不過多克隆抗體因為有bai
多個結合位點du,事實上的zhi特異性並不如單dao克隆抗體,所以一般western blot都儘量要求使用單克隆抗體。以保證實驗結果準確可靠
western blot 一抗和二抗的**必須相同嗎
3樓:向上的
必須相同。比如一抗是鼠源的,那麼二抗必須是鼠源的;如果一抗是兔源的,那二抗必須是兔源的。
否則一抗和二抗無法結合。
western一抗和二抗的稀釋倍數一般是多少?
4樓:匿名使用者
一般抗體bai的說明上,都du給出了一個範圍,zhi
一抗為1:200-2000,二抗為1:1000-10000。
western blot 的原dao理:本質是抗原抗體回反應。第一抗體就是能和非答抗體性抗原(特異性抗原)特異性結合的蛋白。
種類包括單克隆抗體和多克隆抗體。第二抗體是能和抗體結合,即抗體的抗體,其主要作用是檢測抗體的存在,放大一抗的訊號。
5樓:匿名使用者
一般根據抗體的特異性和親和度。一抗的濃度範圍比較大,從1:200到1:
1000都有,這個要多做幾次才能確定。二抗的稀釋倍數打,一般用1:5000到1:
10000就可以了。
6樓:賽智創業
一般抗體的說明上,都給出了一個範圍,可以以這個範圍為根據摸索。一般一抗為1:200-2000,二抗為1:1000-10000.
希望我的回答對您有幫助。
western blot 為什麼要用二抗?直接標記一抗不行嗎?
7樓:螞蟻
之所以用二抗,是因為二抗是帶有酶標的抗體,它跟一抗結合之後可以**顯影。如果你的一抗上面直接帶有酶標物,那可以不用二抗直接**。但是一般你的一抗都是少數應用的,廠家不會大批量生產,就不會費勁給它加酶標。
8樓:匿名使用者
一方面是為了顯影啥的 主要還是是為了增強特異性 放大訊號
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關於小分子蛋白的western blot問題,實驗時的膠濃度
我最小bai也只做過十幾kd的。但是根據原 du理呢zhi主要有以下注dao意事項 1。回當然是膠的濃度。9kda的話要適 答當增大,15 20 應該差不多吧。如果實在不行還能考慮用gradient gel。2。二是轉膜緩衝液,內要含20 甲醇,新鮮配製,反覆使用的話注意甲醇會蒸發掉。如果連續使用的...
WB試驗之如何選擇內參抗體,如何選擇一抗,二抗!如何選擇實驗需要的抗體!最優回答!
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