熒光二抗標記用HRP AP FITC 生物素法各發什麼顏色熒

2021-03-27 19:19:51 字數 1812 閱讀 6560

1樓:

這四個不是一碼事,hrp和ap是酶,二抗上掛了酶,要給相應的底物才能顯色,顯色方式可以通過發熒光也可以不發熒光(例如給予ecl底物,其中的h2o2和魯米諾在hrp的作用下,能在黑暗中發出熒光;也可以給予雙氧水和dab,反應產生棕色不溶於水的物質);fitc為異硫氰酸熒光素,本身就是黃綠色熒光,二抗結合後可直接在熒光顯微鏡下觀察;生物素一般也是掛在二抗上的,利用卵白素分別連線生物素標記的第二抗體和生物標記的酶,由酶催化底物,生成終產物,這個終產物也是不溶於水的。

熒光素標記的生物素應該用什麼溶解

2樓:匿名使用者

這四個不是一bai

碼事,hrp和ap是酶du,二抗上掛了酶,要給相應的底物才zhi能顯色,顯色方dao式可以通過內發熒光也可以不發熒光(容例如給予ecl底物,其中的h2o2和魯米諾在hrp的作用下,能在黑暗中發出熒光;也可以給予雙氧水和dab,反應產生棕色不溶於水的物質);fitc為異硫氰酸熒光素,本身就是黃綠色熒光,二抗結合後可直接在熒光顯微鏡下觀察;生物素一般也是掛在二抗上的,利用卵白素分別連線生物素標記的第二抗體和生物標記的酶,由酶催化底物,生成終產物,這個終產物也是不溶於水的.

if594熒游標記 是什麼顏色

3樓:

這四個不是一碼事,hrp和ap是酶,二抗上掛了酶,要給相應的底物才能顯色,顯版色方式可以通過發熒光權也可以不發熒光(例如給予ecl底物,其中的h2o2和魯米諾在hrp的作用下,能在黑暗中發出熒光;也可以給予雙氧水和dab,反應產生棕色不溶於水的物質);fitc為異硫氰酸熒光素,本身就是黃綠色熒光,二抗結合後可直接在熒光顯微鏡下觀察;生物素一般也是掛在二抗上的,利用卵白素分別連線生物素標記的第二抗體和生物標記的酶,由酶催化底物,生成終產物,這個終產物也是不溶於水的。

fitc標記的二抗是綠熒光還是紅熒光

4樓:

5mmol#47。

(3)抗原對照?

參考見解。因未免疫動物的血清中無特異性抗體:標本直接滴加二抗:

標本加同回種動物的未免疫答血清:最好是同一視野在未用熒光激發下進行對照:如果你做的是石蠟切片免疫組化,看是否非特異性染色,應呈陰性反應(1)你的二抗是用fitc標記的,目的是使dna變性;2n鹽酸需要使用,呈陰性反應,如果是用過氧化物酶做標記.

0-9,為避免熒光分解,後者能使玻片透明,分裝及熒光顯微鏡觀察時均要避光,在加抗免疫球蛋白熒光抗體;l ph9,這個對照必須有。

做間接法免疫熒光染色,目的是看自發熒光,以pbs沖洗後,如何設定對照.5的碳酸氫鹽緩衝液;

(3)關於免疫酶染色。

(2)陰性對照,脫蠟後直接在熒光顯微鏡下觀察,就必須用3%h2o2以去除內源性過氧化物酶。

(1)空白對照,讓brdu抗體能夠充分地與已經摻入的brdu結合;

(2)封片最好用甘油加0

如何選擇熒光二抗?

免疫熒光除了fitc標記以外還可以 用什麼

5樓:南京金益柏生物科技****

還可以tritc標記等等等等,根據你的實驗安排,熒光染料顏色的具體要求,這個染料一般多是標記在二抗上的啊

fitc標記的二抗熒光顯微鏡用什麼波長激發

6樓:夢幻英雄

fitc的激發波長是490nm和494nm,發射波長是520nm和525nm。

如何選擇二抗——根據一抗種屬及型別選擇合適的二抗求解

如何選擇二抗

免疫熒光染色gs是一抗還是二抗,免疫熒光染色的一抗,二抗分別用什麼稀釋?

免疫熒光染色快捷,靈敏.標本冰凍切片,石蠟切片?切片厚薄?影響抗孵育間.選用較佳抗工作濃度.二抗需a液b液室溫混合15鍾再用.標本需儲存 20度.免疫熒光染色的一抗,二抗分別用什麼稀釋?5 pbs稀釋。當然最好用封閉液直接稀釋,再加一點tritonx100效果好。培養液成分太多了。而且固定之後細胞都...

免疫熒光二抗的選擇求教,請教免疫熒光雙標中熒光二抗的選擇是否合適

要是你要用的抗體不就行了,國產跟國外的差別也不是那麼大好不好?建議樓主先做試驗試試,個人覺得影響不會很大。只要fitc標記的羊抗鼠抗體是合格產品即可。經費有限的話,只要得到試驗結果不就行了。請教免疫熒光雙標中熒光二抗的選擇是否合適 一般來說,選擇合適的二抗需要從下面幾個方面考慮 1.二抗應選用與使用...

western blot的一抗 二抗可以重複用麼?一般可以用

儲存得當的話,一抗工作液可重複利用2 3次一般不影響效果,但也不絕對,主要是看你的抗體本身如何,如果第一次做出來效果就不理想就不提倡這麼做了。二抗還是算了吧!那麼便宜,扔了不可惜。westernblot的一抗和二抗都可以用多克隆抗體嗎 western blot的一抗和二抗都 來可以用多克隆 源抗體不...