1樓：匿名使用者
你選bai擇的目的蛋白位於什麼地du方~細胞核 胞質 線粒體~zhi你要觀察的是dao目的蛋白在回哪一部分的答含量~選擇相應的內參~全細胞比如gapdh hsp90aa1等~還有內參分子量要與目的蛋白分子量有一定差距~避免分不開~當然你可以選擇不同種屬的抗體來避免這個問題~
western blot 內參 actin 是43還是45 kda
如何選擇一抗，二抗！如何選擇實驗需要的抗體！最優回答！
2樓：匿名使用者
如何選擇 一抗 二抗！ 你真是問對人了！我現在就告訴你如何選擇實驗需要的抗體！最優回答注意看哦！
1. 一抗選擇
（1）確定抗體的名字，注意中英文名字、別名、亞型等資訊。
（2）確定您的實驗型別，elisa，wb，ihc，icc，或者是facs。biorbyt的每種抗體說明書都會列出抗體經驗證過適用的實驗型別，如果抗體說明書沒有提及的應用型別，並不意味著該抗體不適用於此種分析應用型別，而僅是說明尚未經過此種實驗驗證。
（3）確定實驗樣本的種屬，human，mouse，rat等。我們的抗體說明書都列出該抗體驗證過的適用物種，可根據說明書列出已驗證的種屬來選擇適合你實驗需要的抗體。
（4）樣本抗原蛋白的結構性質。瞭解樣本抗原蛋白的結構性質有助於選擇最合適的抗體，待測樣本蛋白的結構域和樣本在提取和處理過程中是否會變性，蛋白空間構象的改變，會影響抗體的免疫親和反應。
（5）單多克隆抗體的選擇。一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對就低；而多克隆抗體特異性稍弱，但抗體的親和力強，靈敏度高，但易出現非特異性染色（可以通過封閉等避免）。
2. 二抗選擇
（1）種屬**。主要根據一抗種屬**而決定二抗**，如一抗是小鼠**，那二抗就買抗小鼠的即可（羊、兔等均可）。
（2）標記物的選擇。有hrp、biotin、熒光素等標記物。免疫組化，wb二抗主要選擇hrp，biotin標記的二抗，而免疫熒光染色可按實驗需要選擇不同熒光素標記的二抗，如fitc、cy3、pe等。
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