商用大腸桿菌DH5a感受態細胞,是否含有質粒?或者有沒有抗性

2021-04-18 20:07:14 字數 1360 閱讀 9752

1樓:防黴抗菌專家

含質粒,但沒有抗性,可以直接在無抗性的lb板上劃線。

商用大腸桿菌dh5a感受態細胞,是否含有質粒?或者有沒有抗性?

以大腸桿菌dh5a感受態細胞為宿主菌,如何將金黃色葡萄球菌tst基因成功植入pet30a載體

2樓:第八愛德華

首先找到pet30a載體上的兩個酶切位點,然後確認你的tst基因裡面沒有這兩個位點,設計pcr產物,將酶切位點加在你的tst基因上,然後酶切載體和片段,連線

之後將連線產物轉入dh5a感受態細胞,活化塗到對應抗性平板上,做菌落pcr鑑定找到目的菌即可

大腸桿菌dh5a感受態細胞與大腸桿菌bl21感受態細胞有什麼區別

3樓:阿魯巴星人

首先,這兩種菌的基因型不一樣,這就導致了這兩種菌有不同的用途:

dh5a是用於克隆的,構建質粒,建庫,保藏質粒,等等,用的是它。

bl21是專門用來表達蛋白的,如果用於儲存質粒,質粒會很不穩定。

感受態細胞dh5a是什麼

4樓:琴葉紫菀

dh5a是大腸桿菌的一種菌株。

dh5a的感受態是指細胞經過一些特殊方法(電擊法、cacl2法等處理後,細胞膜的通透性發生了暫時性的改變,成為能允許外源dna分子進入的細胞,即感

受態細胞(compenent cells)

5樓:匿名使用者

一般都是用於轉化進外源質粒載體,然後擴增該質粒的。

感受態細菌轉化時需要多大的質粒濃度?

6樓:楊必宇

100-500ng/ul。質粒轉化不少於

bai10的du5次方,zhi連線產物不少於10的6次方。

兩種質粒dao是可以同時進入同一個

版感受態細胞的,比如構建權腺病毒載體時。但是要求兩種質粒進入同一個感受態細胞,轉化效率非常低,一般需要電轉或者其他的特殊處理。增加收菌次數,相對提高了質粒的量,這樣的話裂解液的量可以適當增加;裂解要充分,變性和復性按說明應該是不超過5分鐘,合理控制時間。

7樓:匿名使用者

質粒還是連線產物 質粒的話隨便一點點就可以了 多大濃度的都加1ul吧

8樓:匿名使用者

一般來說10~100ng都可抄

以,不過其襲實我們真正做的時候bai就是du不管濃度多大(濃度約zhi在100ng/ul以上),都是取dao1ul的質粒溶液,稀釋10倍,就是10ul,加入到100ul的感受態細胞裡~每次都這樣做,沒有問題

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