真核基因在大腸桿菌表達中有哪些障礙

2021-05-22 22:49:06 字數 1900 閱讀 9067

1樓:匿名使用者

基因工程所用大腸桿菌表達真核基因都是cdna序列,也就是沒有內含子的。

最大的困難在於有很多真核心基容因表達的蛋白翻譯後修飾。大腸桿菌內沒有特定的分子伴娘,沒有磷酸化修飾酶等等,往往造成得到的蛋白沒有活性。

2樓:高賽

真核基因(dna)中含有不翻譯的 內含子。而原核基因不存在。所以,真核基因在原核細胞(大腸桿菌)中表達之前,要先人為地切去內含子。這樣,就沒有表達的障礙了。

3樓:匿名使用者

除上面bai的回答,還有以下

1 在真核

du中,有些

zhi蛋白需要表觀遺dao傳學的修

飾,回比如甲基化 乙醯化 等,而在原核答生物中是不存在的。

2 有些蛋白在真核中表達比較容易降解,不穩定。

3 有些蛋白可能對原核生物產生毒害脅迫作用,所以不表達或表達後被降解。

4樓:匿名使用者

1、要求外源基因的編碼區不能含有內含子;

2、表達的外源片段要位於大腸桿菌啟動子的下版遊,並形成正確的權閱讀框架;

3、轉錄出的mrna必須有與大腸桿菌16s rrna3,末端相匹配的sd序列,才能被有效的翻譯成蛋白質。

4、蛋白產物必須穩定,不易被細胞內蛋白酶快速降解,且對宿主無害。

真核基因在大腸桿菌中表達具備哪些特點

5樓:猴賽雷吧是我

最大的問題應該是:大腸桿菌是原核生物,動物基因是真核基因,直接用限制酶切獲得的基因在大腸桿菌內表達會錯誤,應該選擇動物的相應基因的mrna反轉錄得到dna,或者根據相應蛋白質的氨基酸排列順序推測dna的鹼基序列獲得dna。

其餘的如樓上後面所答。

為什麼真核基因不能在大腸桿菌中表達

6樓:多1°c熱愛

真核基因是可以在大腸桿菌中表達的。比如現在美國的公司用在大腸桿菌中匯入人的胰島素基因,使其表達,合成胰島素。

原理很簡單

1. 表達載體要有大腸桿菌能夠識別的啟動子、sd序列就行,就好像是一段大腸桿菌本身的dna。

2. 去掉內含子。一般用cdna。

不過真核生物在大腸桿菌中表達會存在無法對翻譯好的蛋白質進行修飾的問題,這樣使得有些蛋白質不具有活性

大腸桿菌作為基因工程菌的受體菌有哪些特點真和基因在大腸桿菌存在哪些障礙

7樓:匿名使用者

遺傳bai背景清楚 ;目標基因表達水du平高;表達系統成熟zhi完善;易於培dao養回(培養方法簡單、生長快、培

答養週期短、抗汙染能力強)、成本低;被美國fda批准為安全的基因工程受體生物。缺點:表達產物缺少飯以後的修飾(如糖基化、烷基化、磷酸化、特異性的蛋白水解加工等);同時高表達時易摺疊錯誤導致表達產物沒有活性,而且大腸桿菌本身含有內毒素和有毒蛋白,可能混在產物裡,應用受限。

真核基因在大腸桿菌中表達:1,真核生物的啟動子不能被原核細胞(大腸桿菌)的rna聚合酶識別;2,真核生物的mrna上沒有sd序列,因此不能被原核細胞核糖體結合;3,真核生物的基因含有內含子,原核細胞缺乏見他們的轉錄物進行拼接加工的機制;4,真核細胞的基因產物,往往需要翻譯後加工,真核細胞缺乏翻譯後加工有關的酶;5,真核生物基因表達的蛋白質易被原核細胞蛋白酶所降解。

8樓:匿名使用者

要仔細研究才能回答 科學來不得半點含糊

一個真核生物的基因在大腸桿菌中不能得到高效表達,可能的原因有哪些

9樓:沙古麗菲絲

沒有接在啟動子後面,或者用連線酶連線的時候把兩個或以上相同的該基因接在了一起。

如何實現真核生物基因在大腸桿菌中的高效表達與純化

真核基因在大腸桿菌中表達具備哪些特點

最大的問題應該是 大腸桿菌是原核生物,動物基因是真核基因,直接用限制酶切獲得的基因在大腸桿菌內表達會錯誤,應該選擇動物的相應基因的mrna反轉錄得到dna,或者根據相應蛋白質的氨基酸排列順序推測dna的鹼基序列獲得dna。其餘的如樓上後面所答。為什麼真核基因不能在大腸桿菌中表達 真核基因是可以在大腸...

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