1樓:猴賽雷吧是我
最大的問題應該是:大腸桿菌是原核生物,動物基因是真核基因,直接用限制酶切獲得的基因在大腸桿菌內表達會錯誤,應該選擇動物的相應基因的mrna反轉錄得到dna,或者根據相應蛋白質的氨基酸排列順序推測dna的鹼基序列獲得dna。
其餘的如樓上後面所答。
為什麼真核基因不能在大腸桿菌中表達
2樓:多1°c熱愛
真核基因是可以在大腸桿菌中表達的。比如現在美國的公司用在大腸桿菌中匯入人的胰島素基因,使其表達,合成胰島素。
原理很簡單
1. 表達載體要有大腸桿菌能夠識別的啟動子、sd序列就行,就好像是一段大腸桿菌本身的dna。
2. 去掉內含子。一般用cdna。
不過真核生物在大腸桿菌中表達會存在無法對翻譯好的蛋白質進行修飾的問題,這樣使得有些蛋白質不具有活性
真核基因在大腸桿菌表達中有哪些障礙
基因工程所用大腸桿菌表達真核基因都是cdna序列,也就是沒有內含子的。最大的困難在於有很多真核心基容因表達的蛋白翻譯後修飾。大腸桿菌內沒有特定的分子伴娘,沒有磷酸化修飾酶等等,往往造成得到的蛋白沒有活性。真核基因 dna 中含有不翻譯的 內含子。而原核基因不存在。所以,真核基因在原核細胞 大腸桿菌 ...
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