1樓：匿名使用者
絕對定量只要做一個就行。
相對定量：△△ct法，只用做一次，把目的基因和內參基因的斜率都調整到-3.32左右，兩者相差不超過0.
1，同時r2≥0.99。則之後就可以不用再做了。
不用，標準曲線法需要每次都做！
2樓：百浩生物
有時候感覺是說了廢法，當然是每次都做標準曲線結果更好了。不過如果你邊著做，並且樣品是同一批配的，這個影響不大，上一批的標準曲線可以用於下一批的。
請問做實時熒光定量pcr實驗時，為什麼做標準曲線？
3樓：匿名使用者
1 做標曲才可以算出這對引物的擴增效率（其斜率），方便用pfaffl方法來進行相對定量（得到的結果相對精確一點），否則只能預設擴增效率為2，用2^-ddct(livak)法來計算
2 做標曲才可以絕對定量。
4樓：匿名使用者
標準曲線是已知量的
做了標準曲線可以實現絕對定量
5樓：匿名使用者
絕對定量和相對定量都可以做標準曲線，目的在於用已知濃度樣品的量做成的標準曲線來定未知濃度樣品的量。
我要用ct法做熒光定量pcr，請問需要做標準曲線嗎
6樓：北京索萊寶科技****
最好是做標準曲線,要看看擴增效率的.
調cdna就還了~
熒光定量pcr的標準曲線怎麼跑
7樓：瀟灑的熱心網友
採用相對法定量要求必須目的基因和內參具有相同的擴增效率,所以需要做efficiency curve如果得到的斜率小於0.1,可以採用相對法,否則,需要重新設計能達到相同擴增效率的引物,或者就需要製作標準曲線,製作標準曲線,可以將基因片段克隆到質粒,然後體外轉錄成rna,定量以後合成cdna,然後按比例稀釋後做出標準曲線,或者可以採用一個一直***的rna樣品,如細胞株,然後以此為標準制作.如果直接採用dna做標準,那前提是rna逆轉錄的效率一致.
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