做realtimepcr時,絕對定量標準曲線的製作

2021-05-12 20:08:48 字數 602 閱讀 2173

1樓:匿名使用者

博凌科為-為你解答:首先,你連基本概念都沒弄清楚,怎麼做實驗?real time pcr用rna?

是你把它和reverse transcription pcr搞混了吧?雖然首寫字母都是rt,但也不至於這麼糊塗的。你先查下基本概念,知道自己要做的是什麼東西,後面會順利很多。

第二個問題,我在你的另一個提問裡已經回答了。至於混合製備,可能是考慮到轉基因和野生型之間的同源性,用來檢測引物或探針特異性的。

請問做實時熒光定量pcr實驗時,為什麼做標準曲線?

2樓:匿名使用者

1 做標曲才可以算出這對引物的擴增效率(其斜率),方便用pfaffl方法來進行相對定量(得到的結果相對精確一點),否則只能預設擴增效率為2,用2^-ddct(livak)法來計算

2 做標曲才可以絕對定量。

3樓:匿名使用者

標準曲線是已知量的

做了標準曲線可以實現絕對定量

4樓:匿名使用者

絕對定量和相對定量都可以做標準曲線,目的在於用已知濃度樣品的量做成的標準曲線來定未知濃度樣品的量。

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