1樓：植物網
（一）生態的原則
（二）高效益原則
（三）參與性原則
（四）突出特色的原則
（五）文化渲染的原則
pcr引物設計應遵循哪些原則
2樓：北京索萊寶科技****
pcr引物設計的11條**法則
1.引物最好在模板cdna的保守區內設計。 dna序列的保守區是通過物種間相似序列的比較確定的。
在ncbi上搜尋不同物種的同一基因，通過序列分析軟體（比如dnaman）比對（alignment），各基因相同的序列就是該基因的保守區。
2.引物長度一般在15~30鹼基之間。 引物長度（primerlength）常用的是18-27bp，但不應大於38，因為過長會導致其延伸溫度大於74℃，不適於taqdna聚合酶進行反應。
3.引物gc含量在40%~60%之間，tm值最好接近72℃。 gc含量（***position）過高或過低都不利於引發反應。
上下游引物的gc含量不能相差太大。另外，上下游引物的tm值（meltingtemperature）是寡核苷酸的解鏈溫度，即在一定鹽濃度條件下，50%寡核苷酸雙鏈解鏈的溫度。有效啟動溫度，一般高於tm值5~10℃。
若按公式tm=4（g+c）+2（a+t）估計引物的tm值，則有效引物的tm為55~80℃，其tm值最好接近72℃以使復性條件最佳。
4.引物3′端要避開密碼子的第3位。 如擴增編碼區域，引物3′端不要終止於密碼子的第3位，因密碼子的第3位易發生簡併，會影響擴增的特異性與效率。
5.引物3′端不能選擇a，最好選擇t。 引物3′端錯配時，不同鹼基引發效率存在著很大的差異，當末位的鹼基為a時，即使在錯配的情況下，也能有引發鏈的合成，而當末位鏈為t時，錯配的引發效率大大降低，g、c錯配的引發效率介於a、t之間，所以3′端最好選擇t。
6.鹼基要隨機分佈。引物序列在模板內應當沒有相似性較高，尤其是3』端相似性較高的列，否則容易導致錯誤引發（falsepriming）。
降低引物與模板相似性的一種方法是，引物中四種鹼基的分佈最好是隨機的，不要有聚嘌呤或聚嘧啶的存在。尤其3′端不應超過3個連續的g或c，因這樣會使引物在gc富集序列區錯誤引發。
7.引物自身及引物之間不應存在互補序列。引物自身不應存在互補序列，否則引物自身會摺疊成髮夾結構（hairpin）使引物本身復性。
這種二級結構會因空間位阻而影響引物與模板的復性結合。引物自身不能有連續4個鹼基的互補。兩引物之間也不應具有互補性，尤其應避免3′端的互補重疊以防止引物二聚體（dimer與crossdimer）的形成。
引物之間不能有連續4個鹼基的互補。引物二聚體及髮夾結構如果不可避免的話，應儘量使其△g值不要過高（應小於4.5kcal/mol）。
否則易導致產生引物二聚體帶，並且降低引物有效濃度而使pcr反應不能正常進行。
8.引物5′端和中間△g值應該相對較高，而3′端△g值較低。 △g值是指dna雙鏈形成所需的自由能，它反映了雙鏈結構內部鹼基對的相對穩定性，△g值越大，則雙鏈越穩定。
應當選用5′端和中間△g值相對較高，而3′端△g值較低（絕對值不超過9）的引物。引物3′端的△g值過高，容易在錯配位點形成雙鏈結構並引發dna聚合反應。（不同位置的△g值可以用oligo6軟體進行分析）
9.引物的5′端可以修飾，而3′端不可修飾。 引物的5′端決定著pcr產物的長度，它對擴增特異性影響不大。
因此，可以被修飾而不影響擴增的特異性。引物5′端修飾包括：加酶切位點；標記生物素、熒光、地高辛、eu3+等；引入蛋白質結合dna序列；引入點突變、插入突變、缺失突變序列；引入啟動子序列等。
引物的延伸是從3′端開始的，不能進行任何修飾。3′端也不能有形成任何二級結構可能。
10.擴增產物的單鏈不能形成二級結構。某些引物無效的主要原因是擴增產物單鏈二級結構的影響，選擇擴增片段時最好避開二級結構區域。
用有關軟體（比如rnastructure）可以**估計mrna的穩定二級結構，有助於選擇模板。實驗表明，待擴區域自由能（△g°）小於58.6lkj/mol時，擴增往往不能成功。
若不能避開這一區域時，用7-deaza-2′-脫氧gtp取代dgtp對擴增的成功是有幫助的。
11.引物應具有特異性。 引物設計完成以後，應對其進行blast檢測。如果與其它基因不具有互補性，就可以進行下一步的實驗了。
3樓：匿名使用者
長度18-25bp，沒有錯配，3』端不是a，gc含量在40到60%
4樓：匿名使用者
1、引物長度一般為15-30bp，常用的為18-27bp，但不能大於38bp；
2、引物gc含量一般為40%-60%，以45-55%為宜，上下游引物gc含量和tm值要保持接近；
3、引物所對應的模板序列的tm值最好在72℃左右，至少要在55-80℃之間，tm值曲線以選取72度附近為佳，5'到 3』的下降形狀也有利於引物與模板的結合；
4、δg值（自由能）反應了引物與模板結合的強弱程度，3'端的δg值相對要低，且絕對值不要超過9，否則不利於正確引發反應，3'末端雙鏈的δg值在0--2kcal/mol時，pcr產量幾乎達到百分之百，但在-6時只達到40%，-8時少於20%，-10時接近於0；
5、錯配率一般不要超過100，否則會出現非目的條帶。但對於某些特定的模板序列，還應結合比較其在正確位點的引發效率。如果兩者相差很大，比如在正確位點的引發效率為340以上，而在錯誤位點的引發效率為110，並且不好找到其他更合適的引物，那麼這對引物是可以接受的；
6、frq曲線為oligo6軟體新引進的一個指標，解釋了序列片段存在的重複機率大小，選取引物時，應該用frq值相對較低的片段；
7、引物二聚體及髮卡結構的能量的絕對值一般不要超過4.5，否則容易產生引物二聚體而且會降低引物濃度從而導致pcr不能正常發生；
8、3'端最好不要是連續鹼基，ggg或ccc會導致錯誤的引發，同時3'端最後一個鹼基最好不要是a或t，若是，會導致錯配；
9、以公式tm=4*（g+c）+2*（a+t）-5計算tm值，也就是退火溫度。選擇較低tm值的引物的退火溫度為反應的退火溫度，最好保證每個引物的tm值相匹配，且在70-75℃範圍內；
10、模板與穩定性較小的引物之間的tm的差異越小，pcr的效率越高。因為解鏈溫度也取決於它的長度，如果期待的產物長度等於或小於500bp，選用端的引物（16-18bp），如果產物長5kb，則用24bp的引物；
11、在dna測序和pcr中最好用5'末端穩定（gc含量多），而3'端不穩定（at含量多）的引物，這種引物的結構可以有效地消除假引發反應；
12、引物和產物之間的tm值相差別太大，20攝氏度範圍內最好。
13、對引物的修飾一般在5'端進行，例如加酶切位點，加酶切位點的同時要根據需要新增保護鹼基。
園林景觀的設計需要遵循哪些原則
5樓：alone_樹
一、園林景觀設計的基本原則：
(1)構園有法，法無定式;
(2)功能明確，組景有方;
(3)因地制宜，景以境出(①頤和園主景突出式②圓明園集景式③避暑山莊風景式);
(4)掇山理水，理及精微(山有三遠，深遠、平遠、幽遠。水之三遠，曠遠、幽遠、迷遠);(
(5)建築經營，時景為精;
(6)道路系統，順勢通暢;
(7)植物造景，四時爛漫。
二、設計要點
1、園林景觀設計要的是什麼效果?
實用、經濟、美觀。
三、八項要求
園林點景中有八項注意，或叫八項要求：
一、襯托、烘托要相稱。如(紅樓夢)中「大觀園稻香村」一景，除有杏花村詩意的主景，菜畦、油菜花、土井、轆轤等配景外，賈珍又提出「只養些鴨、鵝、 雞之類才相稱」。這「相稱」二字便是點景妙諦。
二、是平衡畫面要相宜。即點景要使原景在色調風格上、主賓關係上、景觀質量上更顯輕重得宜，濃淡有致。
三、是對比照應要有目的。有時發覺主賓、濃淡、輕重等關係不夠明顯時，可通過對比照應的手法，在原景物的旁邊再增加一組在比例上、體量上和色度上有較大反差變化的景物，達到以此顯彼的目的。
四、是聯絡要有節奏變化，若斷若續。園林景區景點之間或景觀景物之間距離過大，有分散感時，可於其間點綴一些景物作「過渡」，達到聯絡有致。
五、是鎮定畫面要有力 園林景觀設計遵循原則園林設計。有的景境里布置的景物比較繁雜，顯得熱鬧躁動時，應使用另一種比較有分量的景物點景，達到統攝鎮定的目的
六、是強調加深要適度。如發現原有景觀的色彩、態勢、質惑等的分量氣氛不夠時，可應用加重、加密、加深、加高、加長等點景手法予以強調。
七、是逗引引導要藏露結合。當景點被山林遮蔽時，可點以高塔、危亭等露於林梢，或在景境外點以路亭、牌坊等，藉以引導遊人尋幽訪勝。
八、是暗示隱喻要高雅。若景觀意境過於含蓄，景意用典形式來點景，達到為遊人解惑的目的。
園林景觀設計中景觀燈應遵循哪些設計原則
6樓：實戰建築培訓
園林景觀設計中的景觀燈設計要遵循如下原則：
1、滿足夜間照明的需要，照度要經過照明設計。
2、要滿足美觀設計要求，由於園林景觀屬於公共環境，能夠賞心悅目，要給人以美感。
3、燈具要滿足節能要求，儘量採用節能燈或太陽能燈。
豬舍設計應遵循哪些原則？
7樓：中國農業出版社
豬舍是豬生活的地方，如豬舍環境不良，豬的生長髮育就要受到影響。因此，在修建豬舍時，首先應考慮不同豬群生長髮育的要求，同時也應力求做到先進、合理、經濟、實用，易就地取材。豬舍設計必須遵循以下基本原則：
（1）符合豬的生物學特性要求
豬舍設計應利於保持溫度和溼度，保證舍內空氣清新，光照充足。尤其是種公豬更需要充足的陽光，以激發其旺盛的繁殖機能。
（2）適應當地的氣候及地理條件
各地的自然氣候及地理條件不同，對豬舍的建築要求也各有差異。長江以南地區，氣溫較高，應將防暑降溫作為設計的重點。長江以北地區，高燥寒冷，應將防寒保暖和通風換氣作為設計的重點。
（3）便於實行科學的飼養管理
在設計豬舍時應充分考慮到符合養豬生產工藝流程，符合各類專業豬舍的特定要求，操作方便，利於日常操作和實現機械化，便於實施科學的飼養管理。
（4）安全、衛生、舒適
豬舍設計要考慮結構牢固、安全、衛生、適用，冬暖夏涼、透光通風，乾燥，便於清掃，突出環保意識，注重生物安全，保證良好的生態環境。
（5）經濟適用
①綜合考慮當地的土地、人力、水電、飼料、建築、汙物治理等關係長遠的成本因素以及自身的經濟實力，確定最適宜的生產工藝和飼養模式，在此基礎上，確定豬舍的最佳設計方案，建築的造價要在能夠承受的範圍之內。
②要與現代化的規模豬場所採用的新材料、新技術、新工藝、新裝置相配套，運轉成本要低。
（6）便於採用封閉式飼養
規模豬場機械化程度較高，裝置較先進，很多豬場都配有自動飼餵料系統、溼簾通風降溫系統、自動保溫系統、機械化清糞系統等，而敞開式或半敞開式的建築難以適應上述系統配置的需要；同時，採用封閉式飼養模式還有利於防疫，有利於實現雨汙分離。因此在豬舍設計上必須考慮封閉式建築、封閉式飼養模式。
設計工裝夾具中的壓板應遵循什麼原則
不知道你的壓板用在 的，要看使用環境 一般用途的壓板採用45 淬火回火hrc40 45 設計焊接工裝夾具時應遵循哪些基本原則 一 工裝夾具設計的基本原則 1.滿足使用過程中工件定位的穩定性和可靠性 2.有足夠的承載或夾持力度以保證工件在工裝夾具上進行的施工過程 3.滿足裝夾過程中的簡單與快速操作 4...
上述提問體現了課堂問題設計應遵循哪些原則
1 整體性原則 來整體性是指教學 自過程中所表 bai現出來的教學du人物與教學目標 教學內容與教zhi學組織 課程實dao施與課程開發 教學方式與學習方式等方面和諧完整的形態 2 主體性原則 主體性是人的本質特性，主體性在構成上有三個層次，即自主性 主動性 創造性。3 發展性原則 新課程改革的根本...
提出假設要遵循哪些原則？科學假說應遵循哪些原則
為什麼做假設？首先談談為什麼要做假設，這是很多人首先感到困惑的地方。其實假設在實際生活中無處不在，只是人們沒有意識到這些是假設問題。一般當你要對一件事物做出判斷的時候，其中就隱含著假設。你在小區裡看到一個人形跡可疑，會懷疑這個人是不是小偷，這裡面就隱含著兩個對立的假設 是或不是 少男少女們陷入情網時...