PCR中,引物有要求麼?

2025-03-21 12:30:05 字數 2038 閱讀 1412

1樓:匿名使用者

小黑牛:在pcr中,引物的結迅旁慧構和長度可決定其特異性並保證子鏈從3'端向5』端延伸,畝答這句話,對不對?--不對,子鏈從5'端向3』端延伸 我向問大家,引物有什麼要求麼?

兩個補物分別和兩個鏈的兩端互補 是不是所有的引物idou一樣?--不是 複製特異性片段如目的基因,則如此,但如果複製整個dna,如用於親子鑑定、犯罪分子的確定等,引物設計就不一樣了啟段。

2樓:匿名使用者

pcr基本原理:雙鏈dna分子經高溫變性後成為兩條單鏈dna(模板dna),單鏈dna在互補寡粗笑聚核苷酸片段(引物)的引導下,可以利用反應體系中的dna聚合酶(taqdna聚合酶)和四種轎凳困三磷酸脫氧核苷酸(閉念datp、dctp、dgtp、dttp),按5`→3`方向複製出新的dna互補鏈。

3樓:匿名使用者

我向問大家,引物有什純磨森麼要求麼?--兩個引物分別和兩個鏈的兩端(不一定就是端部)互補 是不是所有的引物idou一樣?--不是,合成不同的目的基因,引物(序列)不一樣。

在做畝dna複製的時候引物是rna,化學本遊滾質不一樣。

pcr引物和測序引物有什麼區別

4樓:墨汁諾

一、定義不同:

pcr是體外酶促合成特異片段的一種方法,由高溫變性、低溫退火(復性)及適溫延伸等反應組成乙個週期,迴圈進行,使目的dna得以迅速擴增,具有特異性強、靈敏度高、操作簡便、省時等特點。

測序引物分自帶引物和通用引物,自帶引物為客戶自行設計的pcr擴增引物或者載體及目的片段上設計的引物進行測序。

二、作用不同:

通用引物一般在購買載體時公司提供,一般測序引物如t7、sp6、m13等測序公司免費使用。

不僅可用於基因分離、轉殖和核酸序列分析等基礎研究,還可用於疾病的診斷或任何有dna,rna的地方。pcr又稱無細胞分子轉殖或特異性dna序列體外引物定向酶促擴增技術。

三、適用不同:

pcr引物又稱為寡核苷酸引物,也就是rna,是由人工合成的,分為兩種,引物1和引物2。由於dna聚合酶只能從核苷酸鏈的5'端到3'端進行復制,也就是隻能識別3'的尾端。

測序必須為特異性引物,不能為隨機、兼併、不純、帶螢光標記、長度過長引物。測序引物長度一般要求在18-25bp,最長不超過30bp..pcr引物要求相對低一些。

簡單說來就是pcr引物可以用來擴增但是不一定適合測序。

5樓:土豆檸檬絲

沒有什麼區別,一代測序測pcr產物的時候,pcr引物就是測序引物。在二代測序的時候由於序列是完全未知的,所以要加接頭(已知序列),測序引物是接頭序列的一部分。

6樓:言吾測序

沒有區別,只是用的地方不同。

為什麼不對稱pcr的兩條引物成為限制性引物和非限制性引物

7樓:刀新蘭鄂詩

你好!不對稱pcr原理的核心在於,它使用的一對引物。

的量(濃度)是不等的。我們知道pcr時需要與目的序列(雙鏈dna)兩條鏈各自的。

端相互補的一對引物,這樣dna聚合酶。

才能進行合成。而不對稱pcr的一對引物,濃度比一般為50~1001。我們啟敏差將濃度少的那條引物稱為限制性引物,因為在它被耗盡之前,pcr反應將擴增出雙鏈的目的序列,而一旦限制性引物提前用完(這是必然的),那麼只剩下一種引物,只能和雙鏈dna的一條鏈配對,從而擴增出的也是一條鏈——這也是不對稱pcr的意義所在:

擴增出單鏈的目的dna序列(ssdna)。也就是說,你用的非限制性引物應該與你的目的單鏈dna的。

端互補配對。

所以,限制的意義在於,先用低濃度的引物(限制性引物)擴增出一定量雙鏈dna作為模板,以達到用高濃度引物(非悄皮限制性引物拿笑)擴增目的單鏈dna的效果。

希望幫到你!

普通pcr需要的引物對為()

8樓:閒風自適

a.一對引物肢旅。

b.半對引物。

c.兩對引物。

d.多對引飢飢衫物。

正確答案:a

PCR引物是目的基因中的一段麼,還是和目的基因中的某段是互補的?

前提表述有誤,因為dna複製。需要rna引物。所以pcr才需要人工引入引物。但是該引物絕對不會在目的基因中,它是一段與dna互補的rna鏈,而且與目的基因之外的兩端互補。要是與目的基因中的序列互補,pcr出來的基因就會是不完整的。pcr引物必須與目的基因片段的一小段序列互補。,pcr引物是利用鹼基互...

農業景觀在設計中應遵循哪些原則,PCR引物設計應遵循哪些原則

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請問有設麼關於質粒構建 引物設計的文獻可以看嗎?要入門的那種

入門的話bai 最好不要看文du獻吧 因為文獻中的都是zhi比較深dao的 是在基礎之上後版人的研究 你想學的權話 建議看看基因工程原理 基因克隆和dna分析方面的書籍 那些是比較基礎的 只有把基礎的東西弄明白了 你才能看懂文獻 我現在也是在學習。請問有設麼關於質粒構建 引物設計的文獻可以看嗎 質粒...