1樓：秘禎勢欣豔
前提表述有誤，因為dna複製。
需要rna引物。
所以pcr才需要人工引入引物。但是該引物絕對不會在目的基因中，它是一段與dna互補的rna鏈，而且與目的基因之外的兩端互補。要是與目的基因中的序列互補，pcr出來的基因就會是不完整的。
2樓：於珊琦成弘
pcr引物必須與目的基因片段的一小段序列互補。
1，pcr引物是利用鹼基互補原則，通過找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板dna序列。
2，首先要找到你用來設計引物的目的基因全序列，一般ncbi、genebank上都能找得到。
3，引物的長度一般為15-30
bp，常用的是18-27
bp，但不應大於38，因為過長會導。
致其延伸溫度大於74℃，不適於taq
dna聚合酶進行反應；引物3』端儘量不要出現3個以上的連續鹼基，如ggg或ccc，這樣會會增加錯配幾率，3』端儘量不要以a為結尾；
引物序列的gc含量一般為40-60%，過高或過低都不利於引發反應。上下游引物的。
gc含量不能相差太大；
g值是指dna雙鏈形成所需的自由能，該值反映了雙鏈結構內部鹼基對的相對穩。
定性。應當選用3』端δg值較低（絕對值不超過9），而5』端和中間δg值相對較高的引物。引物的3』端的δg值過高，容易在錯配位點形成雙鏈結構並引發dna聚合反應；對引物的修飾一般是在5』端增加酶切位點，應根據下一步實驗中要插入pcr產物。
的載體的相應序列而確定。
引物為什麼只會向著目的基因取鹼基互補配對
3樓：h幾小時
pcr引物必須與目的基因片段的一小段序列互補。
1，pcr引物是利用鹼基互補原則，通過找到一對合適的核苷酸。
片段，使其能有效地擴增模板dna序列。
2，首先要找到你孝運納用來設計引物的目的基因全序列，一般ncbi、genebank上都能找得到。
3，引物的長度一般為15-30bp，常用的是18-27bp，但不應大於38，因為過長會導致其延巧沒伸溫度大於74℃，不適於taqdna聚合酶。
進行反應；引物3』端儘量不要出現3個以上的連續鹼基，如ggg或ccc，這樣會會增加錯配幾率，3』端儘量不要以a為結尾；引物序列的gc含量一般為40-60%，過高或過低都不利於引發反應。上悄數下游引物的gc含量不能相差太大；δg值是指dna雙鏈形成所需的自由能。
該值反映了雙鏈結構內部鹼基對。
的相對穩定性。應當選用3』端δg值較低（絕對值。
不超過9），而5』端和中間δg值相對較高的引物。引物的3』端的δg值過高，容易在錯配位點形成雙鏈結構並引發dna聚合反應；對引物的修飾一般是在5』端增加酶切位點，應根據下一步實驗中要插入pcr產物的載體的相應序列而確定。
請問用pcr技術獲得目的基因的大致步驟是什麼？
4樓：稀稀稀稀稀罕
變性（90℃-96℃）：雙鏈枝畝dna模板在熱作用下，氫鍵斷裂猛攔森，形成單鏈dna
2.退火（25℃-65℃）：系統溫度降低，引物與dna模板結合，形成區域性雙鏈。
3.延伸（70℃-75℃）：在taq酶（在72℃左右最佳的活性）的作用下衡拿，以dntp為原料，從引物的5′端→3′ 端延伸，合成與模板互補的dna鏈。
每一迴圈經過變性、退火和延伸，dna含量既增加一倍。（ps：原諒我，我是貼上複製的。）
pcr技術中不是必須要在引物後面形成dna鏈麼?那不是越來越短麼?怎麼生成大量dna鏈的呢?
5樓：仙祿貊千易
pcr反應中有兩條引物，即5′端引物和3′引物。設計引物時以一條dna單鏈為基準（常以資訊鏈為基準）,5′端引物與位於待擴增片段5′端上游的一小段dna序列相同；3′端引物與位於待擴增片段3′端的一小段dna序列互補。
dna的複製需要rna引物，這是由dna聚合酶和rna聚合酶的特性決定的。dna聚合酶不能從頭合成dna（需要引物dna or rna）,因為dna聚合酶具有高保真系統，這個系統要求，在新鏈的延伸過程中，只有新新增的鹼基與模板鍊形成雙螺旋才能繼續鏈的延伸，否則延伸終止，啟動切除修復機制，直至新增正確的鹼基，也即是在dna聚合酶的上游位置一定要互補形成雙鏈（可以是rna-dna）才能繼續下游dna的合成，這是它的忠實性和高保真系統決定的。而rna聚合酶可以從頭合成rna,合成的rna遊離在模板外，不需要與卜數模板形成互補配對的雙螺旋結構就能繼續下游的合成。
兩種酶橋掘的不同機制決定了dna複製時用的只能是rna引物。
pcr反應中所用到的dna引物，是用化學法人工合成的，與模板形成雙鏈後在dna聚合酶的作用下就可以繼續鏈的型消首延伸；而在體內，由於dna聚合酶的忠實性，不能從頭合成dna,因此只能採用rna引物來延伸了。
在參考資料上看到pcr技術需要引物，dna複製也需要引物，dna複製的引物是什麼呢？
6樓：匡雅霜
dna複製的引物是一小段rna，由引發酶合成。
由於dna聚合酶不能從頭合成，所以必須先由一段rna引導，在複製完成後除去，再用dna代替。當然，在另外一些dna複製模型中，末端的莖環結構也可以引導dna聚合酶進行復制。
rna聚合酶可以從頭合成，即轉錄不需要引物。
pcr中引物是人工合成的一小段dna。
關於引物和目的基因的關係。針對某基因設計的同一對引物在不同人的基因組中擴增的片段一定一樣嗎？
7樓：網友
你的理解是正確的。pcr擴增產物完全取決於引物的序列和位置。
對於你說的那個點突變的情況，有不少方法可以加以區別：比如1. pcr擴增後，產物可以測序。也可以酶切。有些點突變可以導致酶切位點的喪失。這樣就可以判斷是否有突變。
2. 針對點突變或者基因多樣性，還可以進行探針螢光即時pcr。引物還是在位點的兩側，但是針對不同的目標核苷酸，探針的序列不一樣。
不同的探針上標記的螢光也不一樣。這樣，pcr時，不同序列在反應中測得的螢光也不一樣，就可以知道各個序列的比例數量了。
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