1樓:匿名使用者
考慮以下因素:1. 核酸染料是否足量2. 瓊脂糖凝膠以及電泳液是否為新制3. dna的量是否足夠
瓊脂糖凝膠電泳跑的dna為什麼會拖尾
2樓:學無止境
可能的原因:
上樣量太大;
上樣時間太長;
dna不夠純,含有蛋白質雜質;
dna的分子量大小不一致;
膠中有核酸酶汙染,dna在移動的過程中,發了斷裂;
膠的濃度不均一;等等。
dna瓊脂糖凝膠電泳中,條帶的明亮與暗淡是什麼造成的?
3樓:天涯戎馬
影響因素如下:1,擴增產物越多亮度越高
2,凝膠成像系統**時間越長條帶越亮
3,與溴化乙錠的用量和膠的質量有關
瓊脂糖凝膠電泳跑完,dna條帶顏色淺怎麼回事
4樓:匿名使用者
你的基因染料好用~可能是dna量不夠~是否測過濃度~還有就是可能條帶彌散了~
瓊脂糖凝膠電泳跑完,dna條帶顏色淺怎麼回事
5樓:匿名使用者
可能是目的基因擴增的量太少,或者上樣量不夠,另外跑膠時間過長也會造成
瓊脂糖凝膠電泳跑成這樣是怎麼回事
6樓:佟珍勢夏
根據我多年的經驗,少年,你的膠背景亮說明你的uv開得太亮了,正常時候不需要這麼強光就能看到條帶。
從你膠的樣子可以看出,你跑膠的時間太長了,看樣子你用的是sybr
green,這種染料在你電泳的時候是會向條帶相反方向移動的,跑時間太長,造成你的膠這樣下面一部分已經看不到marker和背景亮光了。而過長時間跑膠造成的溫度升高(拿在手裡熱乎乎的軟軟的,聽起來像便便。。。),使膠中的樣品和染料很多都擴散出去了,造成你的maker和條帶整個的不夠亮。
從你marker的位置可可以看出你跑膠的時間很長,因為最大的條帶的位置比較低了。
即使你的背景這麼強,也可以看出在你樣品孔的下方很近的地方有條帶,我不知道你樣品的大小和**,但是可以給出以下幾個可能原因:
你的loading
buffer不正確,造成樣品條帶異常移動
最可能原因是你的樣品中dna就那麼大。如果你是提取質粒的話,你做錯某步,把細菌的核dna提取出來了,所以才那麼大。你做錯的可能是裂解那步,裂解時間超過5分鐘了或者你劇烈混合裂解液和細菌了,只有invert就可以了。
你上樣量也要保證,測一下濃度,一般200ng的條帶就非常亮了。
跑膠時候,電壓一般80-120,可以低,也可以高到200,但是室溫下推薦80-100。時長20-60分鐘為宜,一般推薦30分鐘,不過你可以跑一段時間拿出來uv照一下,這時候你可以看到條帶,如果分得不夠開,再放回去跑一會就好了。如果實在需要長時間跑,放4度跑。
7樓:北京索萊寶科技****
電泳出現拖尾現象,就是彌散.其原因,主要從以下兩個方面考慮:
1、pcr產物自身原因:
往往由於酶量過多或酶的質量差,dntp濃度過高,mg2+濃度過高,退火溫度過低,迴圈次數過多,而造成pcr的非特異性產物 過多.
對策:①減少taq酶的量,或調換另一**的酶.②減少dntp的濃度.③適當降低mg2+濃度.④增加模板量,減少引物的用量 ,減少迴圈次數,提高退火溫度.
2、電泳體系的問題:
(1)電泳緩衝液tae或者tbe的汙染,建議更換緩衝液.(2)上樣時樣品漂了,建議增加上樣緩衝液的用量,以及小心加樣.(3)電壓太高.
(4)適當把你的膠的濃度加大.(根據你的片斷大小而定)(5)觀察你的marker是否也存在拖尾現象,作為對照.
瓊脂糖凝膠電泳跑完,dna條帶顏色淺怎麼回事
8樓:匿名使用者
暈怎麼會做成這樣的一個都沒跑出來樣品是什麼不會都是非極性分子吧
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