1樓：匿名使用者
在 western blot 中使用內參其實bai就是在 wb 過程中另du外用內參對應的抗zhi體檢測dao內參，這內樣在檢容測目的產物的同時可以檢測內參的表達，由於內參在各組織和細胞中的表達相對恆定，藉助檢測每個樣品內參的量就可以用於校正蛋白質定量、上樣過程中存在的實驗誤差，保證實驗結果的準確性。
此外使用內參可以作為空白對照，檢測蛋白轉膜情況是否完全、整個 western blot 顯色或者發光體系是否正常。
常用的蛋白質內參有 gapdh 和細胞骨架蛋白 beta-actin 或 beta-tubulin。 一般要選擇一個在處理因素作用的條件下蛋白含量不會發生改變的蛋白作內參。——厚百 western blot試劑
以下是常見的內參：
內參名稱 分子量大小 適用範圍
beta-actin 43 kda 胞漿和全細胞gapdh 30-40 kda 胞漿和全細胞tubulin 55 kda 胞漿和全細胞vcda1/porin 31 kda 線粒體coxiv 16 kda 線粒體
lamin b1 66 kda 細胞核tbp 38 kda 細胞核
關於western blot的內參
2樓：戴雨飛
肯定要加二抗啊，內參和你的目的
蛋白是一樣的，也是一個蛋白，只不過表達比專你的目的蛋白在各個組織屬之間恆定許多，它是你的目的蛋白的一個參照，但是它的作用和mark還不一樣，所以內參是一定要要的，否則，人家會質疑你實驗的可信性。
如果你的實驗動物是大鼠，打個比方一抗是兔抗鼠吧或者其他的什麼抗鼠的，二抗就是什麼抗兔的，比如說羊抗兔之類，一抗最好買國外的，二抗國內的就可以了
western blot內參抗體actin為什麼出了好幾條帶
3樓：
首先要確定你的bai
樣品沒有降du解，基本zhi上看帶型可以確定，條帶
dao要乾淨，沒有拖專尾，其次是你屬的一抗，這個需要跟別個同學做的對比，這兩個問題排除後主要就是你的抗體稀釋度了，濃度過高，顯影底物過強都會出現雜帶，而雜帶跟你每次操作包括洗脫的時間 孵育的時間的不同，都可能出現在不同的位置
4樓：匿名使用者
條件沒有優化好，比如抗體濃度太高，顯影時間太長，然後產生的非特異條帶。
western blot在做內參顯色時整塊膠發亮
因為actin含量比較高，所以相應的一抗和二抗的用量需要減少。整塊膜發亮，基本上就是抗體結合得太多了。先把二抗稀釋10 50倍再試試。western內參兩個條帶是制膠的問題嗎 有圖會好判斷一些。如果是非常明確的兩個條帶應該不是制膠的問題。膠只管分離，最後檢測到，只能說明兩個地方都有訊號。會不會是蛋白...
AC米蘭的AC是什麼意思，AC米蘭的AC是什麼意思啊？
相信喜愛米蘭的人對如何稱呼自己心愛的球會都離不開 ac a米 米蘭 紅黑軍團等等 現在我和大家講解下對米蘭正確的稱呼方式 ac是義大利語足球協會的意思。單用ac兩個字母來表示米蘭是一種侮辱的表達的 方式，估計也只有中國的球迷才會使用 ac 這種說法！這也算是一種中國國情 吧！帕爾瑪的俱樂部全稱是a....
westernblot為什麼出現兩條帶
western blot出現兩條帶是經常會copy發生的情況具體原因可能是該蛋白出現了同源二聚體，故都可以被抗體識別出來或者改蛋白有部分降解，但是未降解部分依然可以和抗體結合另外抗體特異性不高，也會出現非特異性的結合，造成出現兩條或者多條帶所以western blot會出現兩條帶 原因如下 1，可能...