1樓：匿名使用者
western blot出現兩條帶是經常會copy發生的情況具體原因可能是該蛋白出現了同源二聚體，故都可以被抗體識別出來或者改蛋白有部分降解，但是未降解部分依然可以和抗體結合另外抗體特異性不高，也會出現非特異性的結合，造成出現兩條或者多條帶所以western blot會出現兩條帶
2樓：
原因如下：
1，可能是
上樣濃度太大，
2，還有可能是,轉印的時候回膜沒有鋪好，
3，或取下
答來的時候拖動膜了。
解決方法：換換轉印緩衝液，增加點甲醇的濃度。
western blot中文一般稱為蛋白質印跡。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。
通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中的表達情況的資訊。
western blot 出現的結果中條帶怎樣分析
3樓：匿名使用者
利用樣本目的蛋白的光密度比內參照基因條帶的光密度，比較不同樣本的相對錶達率。
4樓：匿名使用者
點個預染marker，看看大小是否正確，wb結果情況很多，描述一下才能幫你分析啊
5樓：
用image j軟體中的條帶灰度分析，很簡單的
western blot 時出現條帶連在一起是怎麼回事
6樓：武漢博歐特生物
wb時連成一條線可能有以下幾種原因：
1）上樣量過大
專 這裡指的是質量數過大，一般上樣在20-100ug之間就屬可以，樓主可以減半上樣量，試試看。
2）一抗孵育時間過長，適當縮短孵育時間，也可以改善。
3）一抗濃度過大 ，抗體如果很好用的話，增大稀釋比例試試。
4）**時間過長，同樣會由此現象。
但是這其中，上樣量影響最大，建議樓主其他條件不動，減少上樣量試試，可以減少一半。
按照自己具體實驗經驗調節。
westernblot出現這樣的條帶是什麼原因
7樓：
1、跑膠 電泳buffer重複利用的時候要注意，不能混濁，有時候能用個回3－4次，有時
候第二次都答不行了，事先前預電泳一下，看看氣泡的均勻度；buffer一定要淹過梳子孔，否則就會發現今天的蛋白不會跑；跑的時候先用低電壓跑過濃縮膠，再換高電壓跑分離膠，不要追求速度，慢慢跑條帶會分離的更好，特別是對於高分子量的目的蛋白； 2、轉膜 溼轉，buffer一定要預冷，最好提前一天配好放4度；濾紙不要大過pvdf膜，防止短路；膠在負極，膜靠近正極，放入tank前檢查一遍會使你免以體會放反的痛心疾首；膜要標記好正反面；轉膜過程中，經常過去看看，防止意外，如電泳儀接觸不好。順帶一提，步驟一樣不一定成功的，有時候是操作不到位所致
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