1樓：匿名使用者
首先你應bai該確認老鼠是不是du轉基因老鼠，會不會有自zhi發熒光的產生
dao。其次，二專抗就是熒光染料，屬只要加了二抗，就會有熒光的產生，所以需要在加完二抗後用pbs洗5次，充分將多餘二抗洗掉，避免在拍片時產生躁點影響實驗結果。
求助 細胞免疫熒光的詳細操作步驟
2樓：匿名使用者
1，取出細胞爬片放到35mm或60mm用過的細胞培養皿裡，pbs洗三遍。注意有的時候作的細胞爬片可能比較小，因此夾取的時候要小心。
2，4%多聚甲醛固定20分鐘，pbs洗三遍。
3，0.2%triton x 100通透10分鐘，pbs洗三遍。
4， 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘，pbs洗三遍。
5.，一抗4度溼盒內過夜，也可37度2小時，感覺前者效果好，pbs洗三遍。
6，二抗室溫2小時，或者37度1半小時，pbs洗三遍。
7，最好用dapi染核，然後直接照熒光片。
8，蒸餾水洗掉pbs，甘油封片，指甲油封**的四周。
細胞免疫熒光，求助
3樓：南京金益柏生物科技****
細胞爬片免疫熒光實驗步驟
第一天：
1. 在培養板中將已爬好細胞的玻片用pbs浸洗3次，每次3min；
2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， pbs浸洗玻片3次，每次3min；
3. 0.5%triton x-100( pbs配製 )室溫通透20min（細胞膜上表達的抗原省略此步驟）；
4. pbs浸洗玻片3次，每次3 min，吸水紙吸乾pbs，在玻片上滴加正常山羊血清，室溫封閉30min；
5. 吸水紙吸掉封閉液，不洗，每張玻片滴加足夠量的稀釋好的一抗並放入溼盒，4℃孵育過夜；
第二天：
6. 加熒光二抗： pbst 浸洗爬片3次，每次3min，吸水紙吸乾爬片上多餘液體後滴加稀釋好的熒光二抗，溼盒中20-37℃孵育1h，pbst浸洗切片3次，每次3min；
注意：從加熒光二抗起，後面所有操作步驟都儘量在較暗處進行。
7. 復染核：滴加dapi避光孵育5min，對標本進行染核，pbst 5min×4次洗去多餘的dapi；
8. 用吸水紙吸乾爬片上的液體，用含抗熒光淬滅劑的封片液封片，然後在熒光顯微鏡下觀察採集影象。
細胞免疫熒光和免疫熒光有什麼區別
4樓：匿名使用者
1：蓋玻片節省抗體2：蓋玻片可以用高倍物鏡，拍攝的影象解析度更高。
求助：細胞膜蛋白免疫熒光染色問題
細胞免疫熒光怎麼封片
5樓：匿名使用者
細胞bai
免疫熒光的詳細操作du步驟 1，取出細胞爬片zhi放到35mm或60mm用過的細dao胞培養皿裡，pbs洗三遍。注回意有的時候答作的細胞爬片可能比較小，因此夾取的時候要小心。 2，4%多聚甲醛固定20分鐘，pbs洗三遍。
3，0.2%triton x 100通透10分鐘，pbs洗三遍。 4， 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘，pbs洗三遍。
5.，一抗4度溼盒內過夜，也可37度2小時，感覺前者效果好，pbs洗三遍。 6，二抗室溫2小時，或者37度1半小時，pbs洗三遍。
7，最好用dapi染核，然後直接照熒光片。 8，蒸餾水洗掉pbs，甘油封片，指甲油封**的四周。
怎樣正確使用imagej統計免疫熒光細胞數設定
所有需要分析的陽性細胞剛好選定！一般還會有一個問題 就是幾個細胞連在一起，被認為是一個細胞，也是可以分開的 怎樣用image j統計熒光強度 我的理解bai不一定對 請指正 應該都du是大同小異的。zhi扣不扣背景熒光是dao其中一個可以考慮的版問題，如權果拍的是confocal 很可能照相時背景已...
能夠做組織免疫熒光的抗體可以做細胞免疫熒光嗎
你好！你用的是單抗嗎？如果是單抗，他們會有說明書說上面是可適用的實驗範圍，那個是給他們驗證過的。如果沒有，你也可以自己嘗試用一下，說不定可以用。但是也有可能結果要麼是不理想，要麼是沒結果。這個要看運氣了。做實驗本身就有運氣成分在裡面的。能做免疫熒光的抗體可做免疫組化實驗嗎 免疫熒光也是組織切片，應該...
免疫熒光二抗的選擇求教,請教免疫熒光雙標中熒光二抗的選擇是否合適
要是你要用的抗體不就行了，國產跟國外的差別也不是那麼大好不好？建議樓主先做試驗試試，個人覺得影響不會很大。只要fitc標記的羊抗鼠抗體是合格產品即可。經費有限的話，只要得到試驗結果不就行了。請教免疫熒光雙標中熒光二抗的選擇是否合適 一般來說,選擇合適的二抗需要從下面幾個方面考慮 1.二抗應選用與使用...