在純化蛋白樣品之前為什麼要進行置換溶液

2021-05-28 05:39:06 字數 446 閱讀 3177

1樓:匿名使用者

分離純化某種蛋白來質,首先要把蛋自白質從原來的組織或細胞中以溶解的狀態釋放出來並保持原來的天然狀態,不丟失生物活性.為此,動物材料應先剔除結締組織和脂肪組織,種子材料應先去殼甚至去種皮以免受單寧等物質的汙染,油料種子最好先用低沸點的有機溶劑如乙醚等脫脂.然後根據不同的情況,選擇適當的方法,將組織和細胞破碎.

動物組織和細胞可用電動搗碎機或勻漿機破碎或用超聲波處理破碎.植物組織和細胞由於具有纖維素、半纖維素和果膠等物質組成的細胞壁,一般需要用石英砂或玻璃粉和適當的提取液一起研磨的方法或用纖維素酶處理也能達到目的.細菌細胞的破碎比較麻煩,因為整個細菌細胞壁的骨架實際上是一個借共價鍵連線而成的肽聚糖囊狀大分子,非常堅韌.

破碎細菌細胞壁的常用方法有超聲波破碎,與砂研磨、高壓擠壓或溶菌酶處理等.組織和細胞破碎後,選擇適當的緩衝液把所要的蛋白提取出來.細胞碎片等不溶物用離心或過濾的方法除去.

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