1樓：歐陽俠
對細菌塗片加入固定，最主要的目的就是讓細菌樣品附著在波片上，這樣後續的染色和沖洗也就不會讓樣品脫落。
細菌的單染色法實驗中塗片為什麼要固定
2樓：竹葉_卿
主要兩個作用：殺死細菌；使菌體與玻片粘附牢固（染色水洗時不易沖掉）。
3樓：匿名使用者
簡單染色
法：利用單一染料對細菌進行染色的一種方法.例如番紅.
1．塗片：用灼燒滅菌冷卻後的接種環挑取少量菌體與水滴充分混勻,塗成極薄的菌膜.
2．乾燥：可自然晾乾,或將塗片置於火焰高處微熱烘乾,但不能直接在火焰上烘烤.
3．固定：手執玻片一端,有菌膜的一面朝上,通過迅速通過火焰2-3次（用手指觸塗片反面,以不燙手為宜）.
4．染色：加適量(以蓋滿菌膜為度)結晶紫染色液(或石炭酸復紅液),染l～2min.
5．水洗：用自來沖洗至流下的水中無染色液的顏色時為止.
6．乾燥
7．鏡檢
復染色：利用用兩種以上染料對細菌進行染色.例如革蘭氏染色法.
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,需要鹼性染料（basic dye）初染液；媒染劑（mordant）；脫色劑（decolorising agent）和復染液（counterstain）.
微生物實驗中為什麼細菌在染色前需要固定？
4樓：晴晴
一：殺死細胞，是染料易於著色。
二：使細菌附著於玻片上，不易被水沖掉。
在固定時，是要慢慢晾乾，如果得確要加快速度，可以處於酒精燈火焰上部遠處稍微烘幾下，切忌烘得玻片升溫，否則有可能會破壞細菌生命形態
細菌的革蘭氏染色與顯微觀察
一、 實驗原理
革蘭氏染色原理：細菌對於革蘭氏染色的不同反應，是由於它們細胞壁的成分和結構不同造成的。革蘭氏陽性細菌的細胞壁主要是由肽聚糖形成的網狀結，當用乙醇處理時，由於脫水而引發網狀結構的孔徑變小，通透性降低，從而使結晶紫-碘的複合物不易被洗脫而保留在細胞內，經脫色和復染後仍保留初染劑的藍紫色。
革蘭氏陰性菌的細胞壁肽聚糖層較薄、類脂含量高，所以當脫色處理時，類脂質被乙醇(或丙酮)溶解，細胞壁透性增大，使結晶紫-碘的複合物比較容易被洗脫出來，用復染劑復染後，細胞被染上覆染劑的紅色。 顯微鏡成像原理：現代普通光學顯微鏡利用目鏡和物鏡兩組透鏡系統來放大成像，故又常 被稱為複式顯微鏡。
顯微鏡的光學系統中，物鏡的效能最為關鍵，油鏡的放大倍數最大，對微生物學研究最為重要。在載玻片與鏡頭之間加滴鏡油主要是為了增加照明亮度和增加顯微鏡的解析度。以油代替空氣作為光的傳播介質，減少光線的折射或全反射，使觀察到的像更加清晰。
二、 實驗器材
1. 菌落：
大腸桿菌24h營養瓊脂斜面培養物、
金黃色葡萄球菌約24h營養瓊脂斜面培養物、 枯草芽孢桿菌12～18h營養瓊脂斜面培養物。
2. 溶液或試劑：
蒸餾水、碘液、結晶紫染色液、95%酒精、番紅染色液、香柏油。 3. 儀器：
顯微鏡、載玻片、接種環、酒精燈、鑷子、擦鏡紙。
三、 實驗步驟
革蘭氏染色：
1. 塗片
取出載玻片，點燃載玻片，燃盡載玻片上的酒精和滅菌，在中間輕輕點一小滴蒸餾水，用接種環在試管的斜面培養基上，輕輕挑取少量菌體，整個過程試管口都要處在酒精燈的上方，而且速度要快，以防汙染培養基。然後在載玻片的小水滴以轉圈的動作塗片，待水滴混濁後停住，等其乾燥、固定。
2. 初染
滴加結晶紫(以剛好將菌膜覆蓋為宜)於菌落上，染色1～2min ，傾去染色液，有細水從載玻片上方向下衝洗，至洗出液為無色，將載玻片上水甩淨。
3. 媒染
滴加碘液衝去殘水，並覆蓋約1min，水洗。
4. 脫色
將載玻片上面的水甩淨，將載玻片傾斜，在白色背景下，用滴管加95%的酒精脫色，直至流出的酒精剛好不出現藍色，立即用水衝淨酒精，將載玻片上水甩淨。
5. 復染
用番紅液復染約1～2min，水洗，然後再吸水紙吸乾
6. 鏡檢：
在低倍鏡下尋找要觀察的細菌菌落（在不停地移動載玻片，若感覺到有紅色陰影，立刻停止，調整倍數，若不是菌落，繼續找），將鏡筒升高，然後轉換到油鏡。在樣品區域加滴香柏油，用粗調節器將鏡筒小心地降下，使油鏡浸在鏡油中並幾乎與標本相接。將聚光器升至最高位置並開足光圈，用粗調節器將鏡筒徐徐上升，直至視野中出現物像並用細調節器使其清晰準焦為止。
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