1樓:匿名使用者
是同一種東西,基本資訊如下
國標編號 81606
cas號 76-03-9
中文名稱 三氯乙酸
英文名稱 trichloroacetic acid簡稱:tca
別 名 三氯醋酸
分子式 c2hcl3o2;cl3ccooh 外觀與性狀 無色結晶,有刺激性氣味,易潮解
分子量 163.40
蒸汽壓 1.3kpa/51℃
閃點:>110℃
熔 點 57.5℃
沸點:197.5℃
溶解性 溶於水、乙醇、乙醚
密 度 相對密度(水=1)1.63
穩定性 穩定
危險標記 20(酸性腐蝕品)
苯酚濃硫酸法測多糖為什麼要加三氯乙酸
2樓:財務諮詢師
蛋白質會影響此方法的測定結果,故需要除去。
三氯乙酸是一種有機酸,使多糖提取液中的蛋白質與有機酸作用而變性沉澱。 該法是 在多糖水提液中滴加 5 %~10 %與多糖水提取液等體積的三氯乙酸,混勻靜置過夜,離心除 去膠狀沉澱,重複以上的操作直至溶液不再繼續混濁為止,得無蛋白質的多糖。 三氯乙酸濃度越大,除蛋白質效果越好,但對多糖的影響也越大,可能是三氯乙酸對多糖結構具有破壞作用,使多糖降解,而且這種破壞作用隨著三氯乙酸濃度增大而增強。
植物多糖常採用三氯乙酸法除蛋白質,也可先用蛋白水解酶,使樣品中的蛋白質部分降解後再用 sevag 法效果更好;微生物多糖去除蛋白常採用 sevag 法、三氟三氯乙烷法;也可用鹽析法、有機溶劑萃取等方法除蛋白。
3樓:匿名使用者
苯酚-硫酸法測多糖含量
原理 多糖在硫酸的作用下先水解成單糖,並迅速脫水生成糖醛衍生物,然後與苯酚生成橙黃色化合物。再以比色法測定。
試劑 1. 濃硫酸:分析純,95.5%
2. 80%苯酚:80克苯酚(分析純重蒸餾試劑)加20克水使之溶解,可置冰箱中避光長期儲存。
3. 6%苯酚:臨用前以80%苯酚配製。(每次測定均需現配) 4. 標準葡聚糖(dextran,瑞典pharmacia),或分析純葡萄糖。
5. 15%三氯乙酸(15%tca):15克tca加85克水使之溶解,可置冰箱中長期儲存。
6. 5%三氯乙酸(5%tca):25克tca加475克水使之溶解,可置冰箱中長期儲存。
7. 6mol/l 氫氧化鈉:120***純氫氧化鈉溶於500ml水。
8. 6mol/l 鹽酸 操作
1.製作標準曲線:準確稱取標準葡聚糖(或葡萄糖)20mg於500ml容量瓶中,加水至刻度,分別吸取0.4、0.
6、0.8、1.0、1.
2、1.4、1.6及1.
8ml,各以蒸餾水補至2.0ml,然後加入6%苯酚1.0ml及濃硫酸5.
0ml,搖勻冷卻,室溫放置20分鐘以後於490nm測光密度,以2.0ml水按同樣顯色操作為空白,橫座標為多糖微克數,縱座標為光密度值,得標準曲線。 2.樣品含量測定:
①取樣品1克(溼樣)加1ml 15%tca溶液研磨,再加少許5%tca溶液研磨,倒上清液於10毫升離心管中,再加少許5%tca溶液研磨,倒上清液,重複3次。最後一次將殘渣一起到入離心管。注意:
總的溶液不要超出10毫升。(既不要超出離心管的容量)。
②離心,轉速3000轉/分鐘,共三次。第一次15分鐘,取上清液。後兩次各5分鐘取上清液到25毫升錐形比色管中。
最後濾液保持18毫升左右。(測肝胰腺樣品時,每次取上清液時應過濾。因為其脂肪含量大容易夾帶殘渣。
)③水浴,在向比色管中加入2毫升6mol/l 鹽酸之後搖勻,在96℃水浴鍋中水浴2小時。
④定容取樣。水浴後,用流水冷卻後加入2毫升6mol/l 氫氧化鈉搖勻。定容至25毫升的容量瓶中。
吸取0.2 ml的樣品液,以蒸餾補至2.0ml,然後加入6%苯酚1.
0ml及濃硫酸5.0ml,搖勻冷卻室溫放置20分鐘以後於490nm測光密度。每次測定取雙樣對照。
以標準曲線計算多糖含量。
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