1樓：小豪
可以用兔抗人的其他抗體做對照，已知不與你的目的蛋白有結合的
希望能解決您的問題。
免疫共沉澱的缺點
2樓：北京索萊寶科技****
（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質－蛋白質相互作用；
（2）兩種蛋白質的結合可能不是直接結合，而可能有第三者在中間起橋樑作用；
（3）必須在實驗前**目的蛋白是什麼，以選擇最後檢測的抗體，所以，若**不正確，實驗就得不到結果，方法本身具有冒險性。
（4）靈敏度沒有親和色譜高。
免疫共沉澱：
免疫共沉澱（co-immunoprecipitation）是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎的用於研究蛋白質相互作用的經典方法。是確定兩種蛋白質在完整細胞內生理性相互作用的有效方法。
免疫共沉澱的注意事項
(1) 確保共沉澱的蛋白是由所加入的抗體沉澱得到的，而並非外源非特異蛋白，單克隆抗體的使用有助於避免汙染的發生；
(2) 要確保抗體的特異性，即在不表達抗原的細胞溶解物中新增抗體後不會引起共沉澱；
(3) 確定蛋白間的相互作用是發生在細胞中，而不是由於細胞的溶解才發生的，這需要進行蛋白質的定位來確定。
3樓：▆▆▆丈
（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質－蛋白質相互作用；
（2）兩種蛋白質的結合可能不是直接結合，而可能有第三者在中間起橋樑作用；
（3）必須在實驗前**目的蛋白是什麼，以選擇最後檢測的抗體，所以，若**不正確，實驗就得不到結果，方法本身具有冒險性。
（4）靈敏度沒有親和色譜高。
免疫共沉澱兩個抗體需要不同種源嗎
4樓：神級人氏
不需要。或者說需要分開一個個證明。用一個抗體去做ip，然後分別用3個抗體做ib,看你抓下的蛋白是否是3個蛋白複合物。
抗體（antibody）指機體的免疫系統在抗原刺激下，由b淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產生的、可與相應抗原發生特異性結合的免疫球蛋白。主要分佈在血清中，也分佈於組織液及外分泌液中。 抗體通常由一些基礎單元組成，每一個抗體包括：
兩個長（大）的重鏈，以及兩個短（小）的輕鏈。而輕鏈和重鏈之間以雙硫鍵連線。輕鏈和重鏈又分為可變區和恆定區，而不同型別的重鏈恆定區，將會導致抗體種型的不同。
求助，免疫共沉澱第一抗體應加多少較為合適
5樓：
不需要。或者說需要分開一個個證明。用一個抗體去做
ip，然後分別用3個抗體做ib,看你抓下的蛋白是否是3個蛋白複合物。
抗體（antibody）指機體的免疫系統在抗原刺激下，由b淋巴細胞或記憶細胞增殖分化成的漿細胞所產生的、可與相應抗原發生特異性結合的免疫球蛋白。主要分佈在血清中，也分佈於組織液及外分泌液中。 抗體通常由一些基礎單元組成，每一個抗體包括：
兩個長（大）的重鏈，以及兩個短（小）的輕鏈。而輕鏈和重鏈之間以雙硫鍵連線。輕鏈和重鏈又分為可變區和恆定區，而不同型別的重鏈恆定區，將會導致抗體種型的不同。
免疫共沉澱和gst pull down技術各有何優勢
6樓：匿名使用者
都是用來研究蛋白質相互作用的技術
免疫共沉澱的話蛋白質是處於天然狀態，蛋白質的相互作用可以在天然狀態下進行，可以避免認為影響，還可以分離得到天然狀態下相互作用的蛋白複合體。
但是問題是兩種蛋白質的結合可能不是直接結合，而可能有第三者在中間起橋樑作用；而且必須在實驗前**目的蛋白是什麼，以選擇最後檢測的抗體，如果抗體選錯了就沒有結果。
gst pull-down是將gst融合蛋白作為探針固化到凝膠柱上，與溶液中的目的蛋白結合。可以用來確定融合（或探針）蛋白與未知（或靶）蛋白間的新的相互作用，證實探針蛋白與已知蛋白質間可疑的相互作用。
但問題是這個方法可能會出現假陽性。也就是也許是因為電荷作用的影響造成的吸附，而不是生理性的相互作用。
免疫共沉澱和免疫沉澱有區別嘛？
7樓：匿名使用者
如果說區別的話，免疫沉澱是單一的特異性抗
體結合其對應抗原，使之聚集沉澱。免疫共沉澱是a抗體結合a抗原，b抗體結合b抗原，如果a抗原能與b抗原相互作用而結合的話，最終aabb都連在一起沉澱，檢測方法可以使用ab在一起激發熒光，分開無熒光，所以當檢測到熒光則說明ab有相互作用，無則沒相互作用，也可使a固定在固相載體，檢測b，若檢測到b則ab有相互作用，若沒檢測到則無相互作用。基本來說免疫沉澱是看有沒有抗原抗體結合，免疫共沉澱則是看兩個抗原有無相互作用
做免疫共沉澱使用哪個公司的抗體比較好
其實標籤就是圖方便，比如你家實驗室要拉100個蛋白來研究，不可能買100個抗體吧？有標籤就一支抗體解決了。另外你說的也對，自身抗體不是個個都好用的。用標籤抗體做染色質免疫共沉澱要注意什麼問題 陰性 陽性對照設定 抗體特異性分析其他 如何看免疫共沉澱圖 分清input和ip，再者就看用什麼抗體ip。i...
免疫共沉澱雜帶太多，怎麼處理
免疫共沉澱是 bai為了檢測目du標蛋白與其他蛋白zhi 是否相互作用dao.elisa一般方法是將目的物質專的抗體加屬入,再加入能夠結合該抗體的另一種被修飾的抗體,後者修飾部分是具有一種酶活性可將某種物質催化形成有色物質,因此顯色陽性反應說明存在目標物質.而免疫共沉澱是將蛋白x抗體結合在固定相上,...
免疫沉澱和免疫共沉澱在實驗方法上具體有什麼區別
1 收穫細胞，加入適量細胞ip裂解緩衝液 含蛋白酶抑制劑 冰上或者4 裂解30min,12,000g離心30 min後取上清 2 取少量裂解液以備western blot分析，剩餘裂解液將1 g相應的抗體和10 50 l protein a g beads加入到細胞裂解液，4 c緩慢搖。什麼是免疫共...