1 蛋白質組學研究方法概述(上)

2025-04-10 14:30:13 字數 2913 閱讀 1429

蛋白質組學研究的主要步驟

1樓:拾柒

蛋白質組學研究的主要步驟如下:

1、蛋白質樣品的制談喊備:蛋白質樣品的製備是蛋白質組學研究的首要環節,也是最為重要的部分。蛋白質樣品的質量直接影響到科學研究的真實性和可信度。

2、蛋白質的分離:雙向凝膠電泳技術是目前最基礎和常用的蛋白質分離方法,它能將數千種蛋白質同時分離與展示的分離技術。雙向電泳分為等電聚焦電泳和sds-page兩個步驟,即先進行等電聚焦電泳,按照pi的不同將蛋白分離,然後再進行sds-page 按照分子量的大小不同對蛋白進行分離。

3、蛋白質雙向電泳凝膠的染色。目前雙向電泳凝膠的染色的方法有3種,分別為考馬斯亮藍染色法羨畝、銀染法和螢光染色法。考馬斯亮藍染色法,操作簡便,無毒性,染色後的背景及對比度良好。

4、雙向電泳凝膠影象的採兄侍森集與分析:影象採集系統通過投射掃瞄根據吸光度的大小獲礙蛋白質點的光密度資訊。一般來說,該光密度值與蛋白質點的表達丰度成正比,以便於軟體分析時的定量比較。

完成影象採集後採用image master等影象分析軟體進行分析。

蛋白質的用處:

1、蛋白質是建造和修復身體的重要原料,人體的發育以及受損細胞的修復和更新,都離不開蛋白質。

2、蛋白質也能被分解為人體的生命活動提供能量。

蛋白質組學的研究方法

2樓:教育生活科

蛋白質組學的研究方法有蛋白質鑑定、翻譯後修飾、蛋白質功能確定、蛋白質靶向定量技術。

1.蛋白質鑑定:可以利用一維電泳和二維電泳並結合western等技術,利用蛋白質晶元和抗體晶元及免疫共沉澱等技術對蛋白質進行鑑定研究。

2.翻譯後修飾:很多mrna表達產生的蛋白質要經歷翻譯後修飾如磷酸化,糖基化,酶原啟用等。

翻譯後修飾是蛋白質調節功能的重要方式,因此對蛋白質翻譯後修飾的研究對闡明蛋槐昌白質的功能具有重要作用。

3.蛋白質功能確定:如分析酶活性和確定酶底物,細胞因子的生物分析/配基-受體結合分析。

可以利用基因敲除和反義技術分析基因表達產物-蛋白質的功能。另外對蛋白質表達出來後在細胞內的定位研究也在一定程度上有助於蛋白質功能的瞭解。clontech的螢光蛋白表達系統就是研究蛋白質在細胞內定位的乙個很好的工具。

4.對人類而言,蛋白質組學的研究最終要服務於人類的健康,主要指促進分子醫學的發展。如尋找藥物的靶分子。

很多藥物本身就是蛋白質,而很多藥物的靶分子也是蛋白質。藥物也可鉛薯扒以干預蛋白質-蛋白手鬥質相互作用。

蛋白組學的研究方法

3樓:麥芽糖的微笑

蛋白組學的研究方法如下:

蛋白質組學的發展既是技術所推動的也是受技術限制的。蛋白質組學研究成功與否,很大程度上取決於其技術方法水平的高低。蛋白質研究技術遠比基因技術複雜和困難。

不僅氨基酸殘基種類遠多於核苷酸殘基(20/4), 而且蛋白質有著複雜的翻譯後修飾,如磷酸化和糖基化等,給分離和分析蛋白質帶來很多困難。此外,通過表達載體進行蛋白質的體外擴增和純化也並非易事,從而難以製備大量的蛋白質。

蛋白質組學的興起對技術有了新的需求和挑戰。蛋白質組的研究實質上是在細胞水巖瞎平上對蛋白質進行大規模的平行分離和分析山棗手,往往要同時處理成千上萬種蛋白質。因此,發展高通量、高靈敏度、高準確性的研究技術平臺是現在乃至相當一段時間內蛋白質組學研究中的主要任務。

當前在國際蛋白質組研究技術平臺的技術基礎和發展趨勢有以下幾個方面: 蛋白質組資料庫是蛋白質組研究水平的標誌和基逗嫌礎。瑞士的swiss-prot擁有目前世界上最大,種類最多的蛋白質組資料庫。

丹麥、英國、美國等也都建立了各具特色的蛋白質組資料庫。

生物資訊學的發展已給蛋白質組研究提供了更方便有效的計算機分析軟體;特別值得注意的是蛋白質質譜鑑定軟體和演算法發展迅速,如swiss-prot、rockefeller大學、bhs寶護神、ucsf等都有自主的搜尋軟體和資料管理系統。

最近發展的質譜資料直接搜尋基因組資料庫使得質譜資料可直接進行基因註釋、判斷複雜的拼接方式。隨著基因組學的迅速推進,會給蛋白質組研究提供更多更全的資料庫。另外,對肽序列標記的從頭測序軟體也十分引人注目。

蛋白質組學的研究手段有哪些

4樓:網友

比較多:最基本的。

1、雙向電泳技術(理想目的:將細胞(或組織)內所有蛋白質都分離開來)2、質譜技術及一系列派生技術 (測蛋白質序列)3 、蛋白質互相作用研究:

酵母雙雜交,細菌雙雜交,免疫共沉澱技術,pull-down,fret,bifc等。

4、蛋白質定位:

螢光標記技術,共聚焦螢光顯微鏡技術,免疫螢光,免疫化學等技術。

什麼是蛋白質組學,研究蛋白質組學有什麼意義

5樓:匿名使用者

核酸排序就是atgc的各種組合,但是蛋白質組學涉及的常用氨基酸就有20多種,這個排序下來複雜度高多了,蛋白還存在各種翻譯後修飾,高階結構等等。而且蛋白質沒有核酸穩定,容易降解,研究起來更難獲得重複性好的結果。

蛋白質組學集中於動態描述基因調節,對基因表達的蛋白質水平進行定量的測定,鑑定疾病、藥物對生命過程的影響,以及解釋基因表達調控的機制。 作為一門科學,蛋白質組研究並非從零開始,它是已有20多年曆史的蛋白質(多肽)譜和基因產物圖譜技術的一種延伸。 多肽圖譜依靠雙向電泳(two-dimensional gel electrophoresis, 2-de)和進一步的圖象分析;而基因產物圖譜依靠多種分離後的分析,如質譜技術、氨基酸組分分析等。

由於可變剪輯及rna的存在,許多基因可以表達出多種不同的蛋白質。因此,蛋白質組的複雜度要比基因組的複雜度高得多。

如果某物種的基因組全序列已經破譯,並不代表該物種的蛋白質組也已破譯。 具體分析某個基因的蛋白質產物要綜合基因組水平、轉錄水平和翻譯水平的修飾及調控來確定。

蛋白質組學,轉綠組學能解決什麼問題

蛋白質組學和轉錄組學都是後基因組時代 post genomics era 中重要的組成部分,其中轉錄組學和基因組結合更緊密,能夠針對性的解決一些組織特異性相關的基因差異的問題,所以近幾年隨著越來越多的基因組獲得測序,加上轉錄組測序成本的降低,獲得了長足的進步,越來越多的物種的基因資訊得到了豐富,很多...

蛋白質組學的技術方法主要有哪些?哪些公司專業,急

現在這個社會,學門技術是不錯的。但是選擇的時候要謹慎一些,畢竟很多行業還是不適合的,學技術看中的是能不能找到工作,或者以後的出路咋樣,就發展來說,廚師這一行不錯,一個存在了幾千年的職業,從來沒有失業,而且21世紀廚師的工資老高了,川菜廚師還走到 都能找到工作。蛋白質組學主要包括哪些分析技術及各自特點...

論述蛋白質組學與基因組學的區別和聯絡

組學omics,研究的是整體.按照分析目標不同主要分為基因組學,轉錄組學,蛋白質組學,代謝組學。基因組學研究的主要是基因組dna,使用方法目前以二代測序為主,將基因組拆成小片段後再用生物資訊學演算法進行迭代組裝。當然這僅僅是第一步,隨後還有繁瑣的基因註釋等資料分析工作。轉錄組學研究的是某個時間點的m...