1樓:匿名使用者
1.dna的釋放:dna位於雞血細胞的細胞核中,正常情況下不會釋放出來。為了使dna從細胞核中釋放出來,實驗中採用了向雞血細胞液中加入蒸餾水並且攪拌的方法。
蒸餾水對於雞血細胞來說,是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內,老培腔使血細胞破裂。同時,再加上攪拌的機械作用,就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂),於是釋放出dna,當然也有rna。但是,釋放出來的大量dna和rna往往與蛋白質結合在一起。
2.將dna與蛋白質分離:根據二者的特性,即在濃度較高的nacl溶液(物質的量濃度為2 mol/l)中,核蛋白容易解聚,遊離出dna。而dna在 濃度較高的nacl溶液中的溶解度很高,na+與帶負電的dna結合成dna鈉鹽。
這時dna在溶液中呈現溶解狀態。 3.dna的析出與獲取:利用dna在濃度較低的nacl溶液中溶解度小的原理,向含有dna的濃度較高的nacl溶液中加入大量(300 ml)蒸餾水,稀釋nacl溶液,使dna的溶解度下降,而蛋白質的溶解度增高(這就是蛋白質的鹽溶現象),從而使二者分離。
這時,加上不停地攪拌,溶解度下降的dna逐漸呈絲狀物。再通過過濾,濾去蛋白質,就可以獲取dna的黏稠物了。如果採用離心法則更好,用4000 r/min 的旋轉頻率,離心15 min ,除去上清液(含有蛋白質),留下的沉澱物中含dna。
4.dna的再溶解:再用較高濃度的nacl溶液去溶解dna黏稠物。 5.dna的沉澱和濃縮:
除去了蛋白質的核酸溶液,必須再進一步沉澱和濃縮。最常用的方法是酒精沉澱中姿法。就是將含有na+的dna溶液,加入到相當於其兩倍體積的體積分數為95%冷酒精溶液中,混勻以後可以使dna沉澱、濃縮,形成含雜質較少的dna絲狀物,懸浮於溶液中。
如果出現的絲狀物較少,可以將此混合液再放入冰箱中冷卻幾分。濃縮後的dna絲狀物,可以用緩緩旋轉玻璃棒的方法捲起(因為玻璃棒有吸附dna的作用)。 6.dna的鑑定:
本實驗中鑑定dna的方法為二苯胺法。二苯胺法的原理是:dna中嘌呤核苷酸上的脫氧核糖遇酸侍衫生成w—羥基—r酮基戊醛,它再和二苯胺作用而顯現藍色(溶液呈淺藍色)。
鑑定時溶液藍色的深淺,與溶液中dna含量的多少有關。
2樓:匿名使用者
實驗原理:
1.析出溶解在nac1溶液中的dna。
2.用冷酒精提取出含雜質遲陸春較少的dna。
在沸水浴時被二苯胺染成藍色。
方法步驟:1.提取細胞核物質:順時針方向攪拌,稍快,稍重。 5 min2.溶解dna:
3.析出含dna的黏稠物:蒸餾水300ml,逆時針方向攪拌,緩慢4.過濾:取黏稠物。
悉塵5.再溶解:順時針方向攪拌,較慢。3 min6.過濾:取濾液。
7.提取出含雜質較少的dna,逆時針方向攪拌,稍慢。5 min8.dna的鑑定:沸水浴碼耐5min
dna粗提取與鑑定實驗步驟
3樓:網友
一 教學目的。
1.初步掌握dna的粗提取和鑑定的方法。
2.觀察提禪早取出來的dna物質。
二 教學建議。
在本實驗的教學中,教師應注意以下幾點。
實驗材料必須準備充足。本實畝襲裂驗所用的實驗材料是雞血細胞液,由活雞的鮮血經沉澱後獲得。每組(2個學生)需用5 ml 雞血細胞迅閉液,則每班(50人)至少需要130 ml,而雞血細胞液與雞血的體積比為1:
3,這樣每班至少需要390 ml 雞血細胞液。
宰殺1只中等大小的活雞,一般可得120 ml 左右的鮮血,因此,1個班實驗需要買4只活雞。如果不具備購買活雞的條件,也可以到市場售活雞處去索取雞血,但所帶燒杯中必須提前放入抗凝劑。
請點選輸入**描述。
dna的粗提取與鑑定知識點
4樓:網友
dna的粗提取與鑑定知識點是在沸水浴條件下,dna遇二苯胺會被染成藍色,因此二苯胺可以作為鑑定dna的試劑。
dna的溶解性:dna和蛋白質等其他成分在不同濃度的nacl溶液中溶解度不同(溶解度最低),利用這一特點,選擇適當的鹽濃度就能使dna充分溶解,而使雜質沉澱,或者相反,以達到分離目的。dna不溶於酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質則溶於酒精。
利用這一原理,可以將dna與蛋白質進一步的分離。
dna對酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解蛋白質,但是對dna沒有影響。大多數蛋白質不能忍受60—80℃的宴簡高溫,而dna在80℃以上才晌喚褲會變性。洗滌劑能夠瓦解細胞膜,但對dna沒有影響。
dna的粗提取與鑑定考點分析:
在平常測試中,該知識點多以選擇題的形式出現。通常考查dna的提取、鑑定方法及操作過程中的注意事項,鏈御出題形式靈活,難度不大。從近幾年生物高考試題看,全國課標捲到目前還沒有涉及到本專題的知識點;在單科生物卷中,涉及到了本部分知識,多以選擇題形式出現,因此,記住相關基礎知識是關鍵。
dna的粗提取與鑑定知識點誤區:提取、鑑定dna的方法、不能用哺乳動物成熟紅細胞作實驗材料的原因、實驗操作中兩次使用蒸餾水的原因是本專題的易錯問題,一定要把握住要點,記清細節知識(如知識點總結),突破相關試題。
dna的粗提取與鑑定實驗的原理是什麼?
5樓:武漢華美生物
dna的粗提取和鑑定實驗是分子生物學中非常基礎的技術,可以用於從不同樣本中提取和純化dna,並確定dna的存在和質量。
dna提取實驗的基本原理是在破碎細胞壁的條件下,使用化學方法和物理方法將dna從其他細胞組分判兄中分離出來。dna鑑定流程包括以下步驟:
1、細胞破碎:通過機械破碎、超聲波處理或細胞裂解液等方法,將細胞破碎,並釋放其中的dna。
2、dna溶解:將破碎後的細胞加入適量的緩衝溶液,使dna分子解離並溶於溶液中。
3、蛋白質去除:加入蛋白酶k等蛋白酶,去除dna溶液中的蛋白質。
4、dna純化:通過離心、過濾和畢答柱層析等技術,將dna與其他雜質分離開來,得到純化的dna。
5、dna質量檢測:手衝慧使用分光光度計等方法測定dna溶液中dna分子的含量和純度,並評估dna的質量和濃度。
整個實驗過程需要嚴格控制各個步驟的條件,避免對dna分子的損傷和汙染。同時,需要使用高精度儀器和試劑,確保獲得高質量的dna樣品,以進行後續研究和應用。
粗提取 dna 的原理是什麼?純化粗提取 dna 的原理是什麼?
6樓:黑科技
答案:解析:答案:
粗轎圓提取dna的原理是談段:dna溶於nacl溶液但在不同濃度的閉侍塌nacl溶液中dna溶解度不同。 純化粗提取dna的原理是:
dna不溶於冷酒精,但細胞中某些物質溶於酒精溶液。
為什麼在dna的粗提取與鑑定中,酒精必須
7樓:水瓶火鍋呀
在dna的粗提取與鑑定中,酒精必須用預冷的95%的酒精,其作用是:
1.抑制核酸水解酶活性,防止dna降解;
2.降低分子運動,易形成沉澱;
3.低溫有利於增加dna柔韌性,減少斷裂。
下列有關「利用菜花進行DNA的粗提取與鑑定」實驗的敘述中,正
a 採用不同 來濃度的nacl溶液反覆溶解與源析bai出dna的方法既可去除在低 du濃度nacl溶液中溶zhi解的雜質,也可以除去dao在高濃度nacl溶液中不溶解的部分蛋白質等雜質,故a正確 b 在切碎的菜花中加入一定量的洗滌劑和食鹽,進行充分攪拌和研磨後過濾獲取濾液,故b錯誤 c 在0.14m...
請問做dna鑑定費用和流程是怎樣的
當事人可以通過相關部門 法院 律師事務所辦理委託手續,也可以直接個人委託進行司法鑑定。要求被鑑定人至少為成年父親 或成年父親和母親 和兒子組成,成年被鑑定人均應自願同意鑑定,12歲以上的青少年具有知情權,應適當徵求其對鑑定的意見。身份證明。當事人需提供身份證 孩子的出生證 或戶口 等證明身份及其相互...
親子鑑定要怎麼做呢,親子鑑定要怎麼樣做
親子鑑定的做法 父或者母可提出確認或者否認親子關係的請求。申請人主張經法院同意受理後,具體的鑑定機構 鑑定人員由雙方協商確認,協商不成,由人民法院指定。依法進行鑑定,並出具相應結果報告。法律依據 中華人民共和國民法典 第一千零七十三條。對親子關係有異議且有正當理由的,父或者母可以向人民法院提起訴訟,...