1樓：網友
有很裂消睜多種原因①菌量少，不容易找到②製片無背景，無法確定細菌所在平面③革蘭氏染色。
的染色時間不夠或者試劑弄錯或者試劑順序搞錯④固定方法不對⑤沒有使用油鏡觀察⑥脫色時間過長⑦載玻片倒置。
研究了菌齡、塗片厚度、媒染時間、乙醇。
脫色程度等對革蘭氏染色結果的影響。結果表明，在進行革蘭氏染色時，大腸桿菌在營養瓊脂培養基上的培養時間不宜超過25小橋譁時，塗片時應為均勻薄片，媒染時間以30～60s為宜。乙醇脫色程度是革蘭氏染色的關鍵，脫色時間應嚴格控制在20～30s。
而枯草芽孢桿菌。
的培養時間不宜超過16小時，媒染時間以30～90s為肆歲宜，脫色時間應嚴格控制在30s以內。
2樓：
革蘭氏陽性菌呈藍紫色，革蘭氏梁遲陰性菌呈紅色。染色後除可以看到細菌形態芹渣高，細分細菌種類。
革蘭氏染色陽性菌包括：嫌尺致病菌如金黃色葡萄球菌、綠色溶血性鏈球菌、肺炎球菌、白喉桿菌、碳疽桿菌等。
革蘭氏陰性菌包括：百日咳桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌、流行性腦膜炎雙球菌、淋病雙球菌等。
革蘭氏染色需要注意哪些問題 為什麼
3樓：老藝術家
革蘭氏染色需要注意哪些問題：1.選用活躍生長期菌種染色，老齡的革蘭氏陽性細菌會被染成紅色而造成假陰性。
2.塗片。不宜過厚，以免脫色不完全造成假陽性。
3.脫色是革蘭氏染色是否成功的關鍵，脫色不夠造成假陽性，脫色過度造成假陰性。
原理：
通過結晶紫初染和碘液媒染後，在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物，革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密，故遇乙醇或丙酮脫色處理時，因失水反而使網孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現縫隙。
因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差，在遇脫色劑後，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出，因此通過乙醇脫色後仍呈無色，再經沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
4樓：景田不是百歲山
1、革蘭氏染色成敗的關鍵是酒精脫色。如脫色過度，革蘭氏陽性菌也可被脫色而染成陰性菌；如脫色時間過短，革蘭氏陰性菌也會被染成革蘭氏陽性菌。脫色時間的長短還受塗片厚薄及乙醇用量多少等因素的影響，難以嚴格規定。
2、染色過程中勿使染色液乾涸。用水沖洗後，應吸去玻片上的殘水，以免染色液被稀釋而影響染色效果。
3、選用幼齡的細菌。g+菌培養12h-16h，培養24h。若菌齡太老，由於菌體死亡或自溶常使革蘭氏陽性菌轉呈陰性反應。
5樓：小仙鸛七號
注意安排g+ g- 對照 過火時候不要太久 孔雀綠不要烤糊了。
6樓：網友
在實驗中需要注意，經常會出現假陽性和假陰性的結果，假陽性主要是由於脫色不完全，可能是由於塗片過厚，或者是結晶紫染色過度，導致脫色不完全。假陰性可能是因為細胞固定過度，造成細胞壁通透性的改變，而出現假陰性結果；另外，細胞培養時間太長，可能已經有部分細胞發生死亡或者自溶，也導致細胞壁通透性的改變而出現假陰性結果。
7樓：卓美落飛
需要注意顏色和脫色時間。
革蘭氏染色的意義是什麼?
8樓：curry咖哩
革蘭氏染色法的重要意義是：革蘭氏染色法不僅用來觀察細菌的形態，而且它還是細菌鑑定的重要方法。
微生物的細胞小且透明，在普通光友棚戚學顯微鏡下不易識別，必須對它們進行染色，使經好陵染色後的菌體與背景形成明顯的色差，從而能更清楚地觀察到其形態和結構。
革蘭氏染色的原理：
革蘭氏陽性菌。
的等電點比革蘭氏陰性菌低，因而革蘭氏陽性菌帶負電荷比革蘭氏陰性菌多，它與草酸銨結晶紫。
的結合力大，用碘-碘化鉀。
媒染後，兩者等電位均降低。
但革蘭氏陽性菌等電位降低得多，故與草酸銨結晶和梁紫結合得更牢固，對乙醇。
脫色的抵抗力強，草酸銨結晶紫、碘-碘化鉀複合物不被乙醇提取，菌體呈紫色，而革蘭氏陰性菌則相反，菌體呈紅色。
革蘭氏染色中哪一步是關鍵？為什麼?如何控制？
9樓：桂林先生聊生活
革蘭氏染色中脫色最關鍵，因為蔽老乙醇脫色是革蘭氏染色操作的關鍵環節：脫色不足，陰性菌被誤染成陽性菌；脫色過度，陽性菌被誤染成陰性菌。因而脫色時間一般控制為20-30s。
革蘭氏染色法。
是細菌學中廣泛使用的一種重要的鑑別染色法，屬於復染法。這種染色法是由丹麥。
醫生革蘭於1884年所發明，祥滑最初是用來鑑別肺炎球菌。
與克雷伯肺炎菌。革蘭染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟。
染色原理：
通過初染和媒染後，細胞內形成了不溶於水的結晶紫。
一碘大分子複合物。革蘭氏陽性細菌由於細胞壁較厚、肽聚糖含量較高和其分子交聯度較緊密，故在用乙醇洗脫時，肽聚糖網孔會因脫水而明顯收縮，加上它基本不含類脂，故乙醇處理不能在壁上溶出縫隙。
因此，結晶紫與碘複合物仍牢牢阻留在細胞壁內，使其呈現紫色。而革蘭氏陰性細菌因其壁薄、肽聚糖含量低和交聯鬆散，故遇乙醇後，肽聚糖網孔不易收縮，加上它類脂含量高，所以當乙醇把類脂溶解後，在細胞壁上就會出現較大縫隙，複合物容易溶出細胞壁，因此通過乙醇脫色後，細胞又成無色。
這時再用紅色染料進行復染，革蘭氏陰性細菌將獲得一層新的顏色——紅色謹並臘，而革蘭氏陽性菌。
則仍呈紫色。
細菌的革蘭氏染色失敗的原因
10樓：北網域名稱醫
一般是乙醇。
脫色時間過長。
革蘭氏陽性菌。
呈藍紫色，革蘭氏陰性菌。
呈紅色。染色後除可以看到細菌形態，細分細菌種類。
革蘭氏染色陽性菌包括：致病菌如金黃色葡萄球菌、綠色溶血性鏈球菌。
肺炎球菌、白喉桿菌。
碳疽桿菌等。
革蘭氏陰性菌包括：百日咳桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌。
霍亂弧菌、流行性腦膜炎。
雙球菌、淋病雙球菌等。
革蘭氏染色的步驟和原理，簡述革蘭氏染色的操作步驟
操作步驟 1 塗片 將培養的不同菌分別作塗片 注意塗片切不可過於濃厚 乾燥 固定。固定時通過火焰1一2 次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。2 染色 1 初染加草酸鉸結晶紫一滴，約一分鐘，水洗。2 媒染滴加碘液衝去殘水，並覆蓋約一分鐘，水洗。3 脫色將載玻片上面的水甩淨，並襯以白背景，用95 酒精...
細菌的革蘭染色性不同是因為什麼,革蘭氏染色法的重要意義是什麼
根據革蘭染色將細菌分為革蘭氏陰性菌 染成粉紅色 和革蘭氏陽性菌 染成紫色 染色步驟分為 初染，媒染，脫色，復紅 該染色法所以能將細菌分為g 菌和g 菌，是由這兩類菌的細胞壁結構和成分的不同所決定的。g 菌的細胞壁中含有較多易被乙醇溶解的類脂質，而且肽聚糖層較薄 交聯度低，故用乙醇或丙酮脫色時溶解了類...
細菌中革蘭氏染色法的過程是怎樣的
微生物的染色方法很多，各種方法應用的染料也不盡相同，但是一般染色都要通過製片及一套染色操作程式。1 製片 在乾淨的載玻片上滴上一滴蒸餾水，用接種環進行無菌操作，挑取培養物少許，置載玻片的水滴中，與水混合做成懸液並塗成直徑約1釐米的薄層，為避免因菌數過多聚成集團，不利觀察個體形態，可在載玻片之一側再加...