1樓：匿名使用者
例如：酶活力測定、dna/rna染色觀察、基因重組等試驗。
求生物化學實驗大神教一道題目！希望儘可能詳細解答，知識點要準確。 1號試管:1ml卵清蛋白+1ml
2樓：匿名使用者
首先需要明確蛋白質沉澱、變性。
只有高濃度乙醇長時間作用才會使蛋白質變性,低濃度的乙醇會使蛋白質的親水結構（氫鍵）破壞而沉澱析出,類似於鹽析。發生沉澱的蛋白在合適的條件下會重新溶解（如溶於稀酸或稀鹼），蛋白質仍有活性。
變性的蛋白質是不會再溶解了，因為變性即意味著結構的永久改變，蛋白失去活性了。
1.有機溶劑助沉法 + 等電點法沉澱蛋白.
1號試管內乙醇終濃度為32%，不能使蛋白變性，只能使蛋白沉澱，同時卵清蛋白的等電點pi是4.6-4.7，蛋白質在等電點時產生沉澱。
2.乙醇改變蛋白質的親水結構導致沉澱，而加入0.1m naoh後，使溶液ph遠離蛋白質等電點（稀鹼），在鹼性條件下蛋白質重新溶解。
加入naoh後溶液為鹼性，故加入甲基紅後為黃色；
加入1m 醋酸後（遠高於0.1m的naoh），使ph降低，醋酸/醋酸鹽緩衝溶液的ph=pka =4.757,接近卵清蛋白的等電點，故蛋白會重新沉澱（等電點沉澱），此時溶液為酸性，故甲基紅顯示紅色。
甲基紅是ph指示劑,變色範圍是ph4.2(紅)--6.2(黃)。
生物化學實驗考試
生物化學實驗題(高手或老師進)急!!!!!!!!
3樓：匿名使用者
這個還是很有難度
的，我是學生物的，但研究方向不是
說點粗淺想法：
即然是要證明其是否有校正功能，那肯定是通過觀察用野生型聚合酶i指導的dna合成其鹼基配對正確率高低
不知可否人工pcr，通過pol i 與其它人工合成酶對比，分析結果
4樓：匿名使用者
先把野生型的大腸桿菌置於不利於其生長環境，生長就會受到抑制，然後再把其置於有利其生長環境中，如果能生長，就能證明dna聚合酶ⅰ具有自我校正能力
5樓：
（1）原核生物大腸桿菌dna聚合酶
1)dna聚合酶ⅰ。在隨從鏈合成時，先合成了許多岡崎片段，而後由於rna引物的去除形成了空隙，此時dna polⅰ它催化聚合反應，延長了各個片段，從而填補了片段間的間隙，使以上片段得以靠近，為片段連線成長鏈創造了條件。所以dna polⅰ的聚合作用主要是在填補隨從鏈片段間空隙上發揮作用。
dna polⅰ還具有3′→5′外切酶活性可識別並去除錯誤的鹼基。這種活性在dna複製中起了校對功能。dna polⅰ的校對活性對dna複製的準確性起著重要作用。
dna polⅰ還具有5′→3′外切酶活性。5′→3′外切酶活性也有修正錯誤的功能，補充其3′→5′外切酶修正錯誤的作用。例如紫外照射產生的嘧啶二聚體，就是在其5′→3′切酶作用下切除的。
dna pol ⅲ結構中不對稱的二聚體，同時分別催化著前導鏈和隨從鏈的合成。
dna pol ⅲ也具有3′→5′外切酶活性，所以對於dna複製也有校對的功能，可停止加入或除去錯誤的核苷酸然後繼續加正確的核苷酸。因此，dna polⅲ配合dnapoli可將複製的錯誤率大大地降低，從10-4降為10-6或更少。 當此片段接近前方的片段時，由dna pol ⅲ的5′→3′外切酶活性切除了rna引物，造成了片段間的空間；繼而dna poli催化進行5′→3′方向的聚合作用，填補了片段間的空隙。
（2）真核生物dna聚合酶。 真核生物dna pol有α、β、γ、δ及 ε五種。
真核生物的dna複製是在dna聚合酶α與dna聚合酶δ互配合下催化進行的，還有一些酶及蛋白質因子參與反應。dna polα與引發酶共同起引發作用，然後由dna polδ催化前導鏈及隨從鏈的合成。dna polγ是線粒體中dna複製酶。
dna polδ及ε均有外切酶活性，因此也有編輯功能，校正複製中的錯誤。它們的5′→3′外切酶活性可能在切除引物rna中有作用。（2）真核生物dna聚合酶。
真核生物dna pol有α、β、γ、δ及 ε五種。酶活性
6樓：大衰哥無敵
我只知道這些
一、dna的複製的特徵
1．半保留複製 在dna複製時，親代的每一條鏈均可作為模板合成一條新鏈。一條來自親代的舊鏈與一條新鏈以氫鍵相連，形成子代雙鏈dna。由於兩個子代分子中各有一條鏈來自親代，而另一條鏈是新生成的，所以這就是半保留複製方式。2
7樓：匿名使用者
任何問題都不是問題.如何解決問題才是問題.
8樓：不知火舞
不會！！！！！！！！！！！！1
9樓：匿名使用者
這都不會 你是考研的嗎 真丟人 高中幹嗎呢
生物化學實驗分析題
10樓：匿名使用者
前兩抄種方法根據分子量襲，越大越晚出峰。d最先出峰，然後是b、c，最後是d。後兩種根據分子量和等電點。
縱向從上到下是acbd，橫行從左到右是cdba。縱向是page電泳，分子量越大跑的越慢，橫向是根據等電點，此處預設橫向的酸鹼度是從低到高（從左到右）。
生物化學實驗：蛋白質的兩性反應和等電點測定 以下3個問題急求答案~ 求求各位大俠相助啊！
11樓：匿名使用者
1.當蛋白質溶來液處於某一ph時，源蛋白質解離bai成正、負離子的趨勢du相等，即成為兼zhi
性離子，淨電荷dao為零，此時溶液的ph稱為蛋白質的等電點。在等電點時蛋白質的溶解度最小，在電場中不移動。
在pi時，蛋白質失去了膠體的穩定條件，即沒有相同電荷相互排斥的作用。所以不穩定，溶解度最小，易沉澱。
其他的不清楚
12樓：
當溶液為某一ph值時，氨基酸分子中所含的-nh3+和-coo-數目相等，淨電荷為0。這一ph值即為氨基酸的等電點，簡稱pi。在等電點時，氨基酸既不向正極也不向負極移動，即氨基酸處於兩性離子狀態。
生物化學實驗，生物化學實驗
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