1樓:刀劍信譽
現代分子生物學是研究生物大分子--核酸及其表達產物蛋白質的結構、功能、遺傳、調控、相互關係和相互作用,從分子水平上**生命現象的科學,其主要研究物件是核酸(dna和rna)和蛋白質。自從2023年watson和crick發現dna的雙螺旋結構以來,分子生物學在短短五十年時間裡以超乎想象的速度飛速發展,滲透到醫學每一個領域。可以毫不誇張的說,如果沒有分子生物學的應用,人類探索生命活動的行為將會寸步難行。
將分子生物學技術應用到臨床檢驗診斷學,使疾病診斷深入到基因水平,稱為基因診斷。基因診斷技術主要包括核酸分子雜交技術、聚合酶鏈式反應(pcr)技術、基因多型性分析技術、單鏈構象多型性(sscp)分析技術、熒光原位雜交染色體分析(fish)技術、波譜核型分析(sky)技術、dna測序技術、基因晶片技術以及蛋白質組技術等,一些先進的分離和檢測技術大大促進了上述技術的完善和發展,如毛細管電泳技術(ce)、液質聯用技術(lc/ms/ms)、變性高效液相色譜技術(dhplc)、非熒光遺傳標記分析技術等。基因診斷在感染性疾病、遺傳性疾病、腫瘤性疾病等的診斷中發揮越來越重要的作用。
下面,我們就臨床檢驗診斷中涉及的主要分子生物學技術作一簡要介紹。
1.核酸分子雜交技術
即基因探針技術。利用核酸的變性、復性和鹼基互補配對的原理,用已知的探針序列檢測樣本中是否含有與之配對的核苷酸序列的技術。是臨床應用最早的,也是最基礎的分子生物學技術,是印跡雜交、基因晶片等技術的基礎。
不少探針已經商品化。
2.pcr技術
pcr技術是一種特異擴增dna的體外酶促反應,可以短時間擴增出兩段已知序列之間的dna,用於診斷、鑑定、製備探針及基因工程產品開發等,是一項及其有效和實用的技術。由於pcr試驗存在一定的假陽性和假陰性問題,導致pcr技術在我國臨床診斷中的應用曾一度被叫停,近年來由於改進的pcr技術如巢式pcr(nested pcr)、多重pcr(multiplex pcr) 、熒光pcr技術等在較大程度上增加了該技術的敏感性和特異性,加上衛生部於 2002-01頒發了有關基因擴增檢驗技術臨床應用的法規性檔案《臨床基因擴增檢驗試驗室管理暫行辦法》(衛醫發〔2002〕10號 ),要求從事臨床基因擴增檢驗的技術人員必須經過衛生部臨床檢驗中心或授權的省級培訓機構的上崗培訓,持證上崗,使pcr技術在臨床檢驗診斷中重新發揮其不可替代的作用,pcr已廣泛用於核酸的科學研究以及臨床疾病的診斷和**監測,尤其在感染性疾病診斷方面更有應用價值。
3.基因多型性分析技術
在人群中,各個體基因的核苷酸序列會存在一定差異,稱為基因多型性。基因多型性位點普遍存在於人的基因組中,並按孟德爾遺傳方式遺傳。如果在某個家庭中,某一致病基因與特定的多型性片段緊密連鎖,就可以用這一多型性片段作為一種「遺傳標記」來判斷家庭成員或胎兒是否攜帶有致病基因。
目前認為基因多型性是個體的「身份證」;有的雖然不表現疾病,但也許會影響對藥物的反應和用藥效果。因此,基因多型性分析技術已經廣泛應用於群體遺傳學研究、疾病連鎖分析和關聯分析、疾病遺傳機制研究、腫瘤易感性研究、個性化用藥等諸多方面。遺傳學上把基因多型性片段稱為遺傳標記。
遺傳標記分析經歷第一代限制性酶切片段多型性(restriction fragment length polymorphi**, rflp)、第二代微衛星dna(microsatellite dna),現已發展到第三代單核苷酸多型性分析(single nucleotide polymorphi**, snp)。下面分別介紹如下:
3.1限制性酶切片段多型性(rflp)分析技術
rflp是利用限制性內切酶在特定的核苷酸序列切割雙鏈dna後凝膠電泳分離開不同大小片段,由於不同個體存在核苷酸序列差異導致限制性酶切位點變化從而使酶切片段呈現多型現象。傳統的rflp方法是指基因組dna經限制性內切酶酶切,電泳分離後再結合southern 印跡雜交,構建出dna指紋圖,這種方法特異性和敏感性均較高,但操作繁雜。目前結合pcr技術產生pcr-rflp方法,是檢測與特定的酶切位點有關的突變的簡便方法。
rflp方法在遺傳性疾病診斷、微生物種屬分型、腫瘤發病及診斷研究等領域應用廣泛。
2樓:模具行業淘汰
江畔獨步尋花 杜甫
3樓:謬賜撒瑾
生物的都不樂觀,特別是生物化學與分子生物學專業的。如果不是特別優秀的話,目前來看是沒啥前途
分子生物學技術在醫學中的主要應用
4樓:匿名使用者
分子生物學技術在醫學中的主要應用有:
疾病診斷,生物工程與生物製藥。
分子病理學臨床應用主要有哪幾個方面
5樓:春素小皙化妝品
從分子水平闡述基因組、基因、基因轉錄及其調控,細胞週期和訊號轉錄等分子醫學基礎;主要疾病的病理變化分子機制及其關鍵性研究技術;迅速發展的基因診斷、基因**和基因工程蛋白質工程新藥的研究。
分子病理學與人體解剖病理學及臨床病理學、分子生物學、生物化學、蛋白質組學和遺傳學,以及有時被視為「交叉」學科等有一定共同點。其本質及主要側重於疾病的亞微觀表現決定了它的多學科性質。
分子病理學包括運用分子和遺傳學方法對腫瘤進行診斷和分類,設計和驗證對**反應和病情發展的**性生物標記物,不同的基因構成造成的對腫瘤的個人易感性,還有環境因素和生活方式對腫瘤發生的影響。
擴充套件資料
病理學在醫學研究中的作用
現代病理學吸收了當今分子生物學的最新研究方法和取得的最新成果,使病理學的觀察從器官、細胞水平,深入到亞細胞、蛋白表達及基因的改變。這不僅使病理學的研究更深入一步,同時也使病理學的研究方法滲透到各基礎學科、臨床醫學、預防醫學和藥學等方面。
如某一基因的改變是否同時伴隨蛋白表達及蛋白功能的異常,是否可以發生形態學改變;反之,某種形態上的異常是否出現某個(些)基因的異常或表達的改變。
臨床醫學中一些症狀、體徵的解釋、新病種的發現和預防以及敏感藥物的篩選、新藥物的研製和毒***等都離不開病理學方面的鑑定和解釋。因此,病理學在醫學科學研究中也佔有重要的地位。
常用的分子生物學技術包括哪些
6樓:趁早
分子生物學技術:
pcr、分子克隆、核酸
電泳、瓊脂糖凝膠電泳測序、dna, rna 提取、轉化外源dna、體外轉錄、逆轉錄、cdna文庫構建、原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交、藍白斑篩選、抗生素篩選 、基因工程技術大部分都是依據分子生物學原理設計出來的。
分子生物學的基本含義
分子生物學是從分子水平研究生命本質為目的的一門新興邊緣學科,它以核酸和蛋白質等生物大分子的結構及其在遺傳資訊和細胞資訊傳遞中的作用為研究物件,是當前生命科學中發展最快並正在與其它學科廣泛交叉與滲透的重要前沿領域。分子生物學的發展為人類認識生命現象帶來了前所未有的機會,也為人類利用和改造生物創造了極為廣闊的前景。
所謂在分子水平上研究生命的本質主要是指對遺傳、 生殖、生長和發育等生命基本特徵的分子機理的闡明,從而為利用和改造生物奠定理論基礎和提供新的手段。這裡的分子水平指的是那些攜帶遺傳資訊的核酸和在遺傳資訊傳遞及細胞內、細胞間通訊過程中發揮著重要作用的蛋白質等生物大分子。這些生物大分子均具有較大的分子量,由簡單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊藏各種資訊,並且具有複雜的空間結構以形成精確的相互作用系統,由此構成生物的多樣化和生物個體精確的生長髮育和代謝調節控制系統。
闡明這些複雜的結構及結構與功能的關係是分子生物學的主要任務。
7樓:匿名使用者
提取基因組dna,質粒提取,pcr,電泳,膠**,酶切,連線,大腸桿菌轉化,真菌轉化(原生質體或atmt轉化),sourthern blot,northern blot等等
分子生物學技術都包括哪些技術
8樓:東門有福塞釵
分子生物學技術:
pcr、分子克隆、核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳測序、dna,rna提取、轉化外源dna、體外轉錄、逆轉錄、cdna文庫構建、原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交、藍白斑篩選、抗生素篩選
、基因工程技術大部分都是依據分子生物學原理設計出來的。
分子生物學的基本含義
分子生物學是從分子水平研究生命本質為目的的一門新興邊緣學科,它以核酸和蛋白質等生物大分子的結構及其在遺傳資訊和細胞資訊傳遞中的作用為研究物件,是當前生命科學中發展最快並正在與其它學科廣泛交叉與滲透的重要前沿領域。分子生物學的發展為人類認識生命現象帶來了前所未有的機會,也為人類利用和改造生物創造了極為廣闊的前景。
所謂在分子水平上研究生命的本質主要是指對遺傳、生殖、生長和發育等生命基本特徵的分子機理的闡明,從而為利用和改造生物奠定理論基礎和提供新的手段。這裡的分子水平指的是那些攜帶遺傳資訊的核酸和在遺傳資訊傳遞及細胞內、細胞間通訊過程中發揮著重要作用的蛋白質等生物大分子。這些生物大分子均具有較大的分子量,由簡單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊藏各種資訊,並且具有複雜的空間結構以形成精確的相互作用系統,由此構成生物的多樣化和生物個體精確的生長髮育和代謝調節控制系統。
闡明這些複雜的結構及結構與功能的關係是分子生物學的主要任務。
9樓:山東萬通汽車學院
分子生物學檢驗技術:是以核酸或蛋白質為分析材料,通過分析基因的結構、表達的變化和由此而導致的基因功能的改變,為疾病的研究和診斷提供更準確、更科學的資訊和依據的一門學科。
10樓:玩酷
pcr分子克隆
核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳
測序dna, rna 提取
轉化外源dna
體外轉錄、逆轉錄
cdna文庫構建
原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交
藍白斑篩選、抗生素篩選
基因工程技術大部分都是依據分子生物學原理設計出來的。
11樓:匿名使用者
pcr單鏈構象多型性分析
變性梯度凝膠電泳
雙鏈構象多型分析法
變性- 高壓液相色譜分析
特異性等位基因擴增
化學裂解錯配鹼基法
臨床分子生物學檢驗技術有哪些?主要有哪些應用?2.何為不確定度
12樓:
主要應用
遺傳病檢測,無創產前檢查,遺傳性癌症基因篩查,病原體細菌或病毒的檢測,定量和分型
幫忙看下一道分子生物學題,求一道分子生物學填空題答案
題目要求您設計實驗來檢測人體中哪些組織能特異性表達您克隆的cdna,也就是這個基因的表達。大致設計如下 1,設計引物,取各組織,做逆轉錄pcr,直接檢查其mrna的有無 2,對於 express 的理解,我認為要包括蛋白質的最終表達,所以,用該蛋白的抗體,對各組織的勻漿物進行western blot...
生物化學與分子生物學最常用的實驗技術包括什麼
分子生物學實驗技術,是進行分子生物學理論和應用研究的技術,主要有核酸分離內純化或合成 核苷容酸順序測定 分子雜交和dna人工重組技術。核心是dna人工重組技術 核酸分離純化或合成 核苷酸順序測定和分子雜交技術都服務於dna重組技術。分子抄細胞生物學研究所用的實驗襲技術有哪些分子診斷學的研究範疇包括 ...
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在國內想學和想考研是兩個概念 想學的話推薦本傑明盧因 美 的geneviii,別看中版譯本,爛 watson的molecular biology of the gene,科學出版社權也出中譯本了,最近才在圖書館看到 想考研要看報考校的教材吧。學校上面有參考書目的啦 指定教材搞定就差不多了啦 我覺得看...