1樓:匿名使用者
免疫組化中,所染色的蛋白的位置與該蛋白的特性有關係。在現有所研究的蛋白中,不少蛋白存在核轉位的情況, 也就是說當細胞培養的環境或者刺激的因素不同,該蛋白會出現從胞漿到細胞核的表達位置的改變。有時候表達不變僅僅是從胞漿轉位到細胞核,有時候還伴有表達的上調,比如nf-kb。
ripa裂解液對核蛋白的提取好點。加到細胞培養皿裡面,搖15分鐘,然後刮下來吸出來,是做western的話加loading buffer 再95°煮10分鐘。
裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用於經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。經紅細胞裂解液裂解得到的組織細胞中不含紅細胞,可進一步用於原代培養、細胞融合、流式細胞分析、核酸與蛋白的分離和提取等。
細胞核內蛋白和細胞漿蛋白提取有什麼區別
2樓:匿名使用者
免疫組化中,所染色的蛋白的位置與該蛋白的特性有關係。在現有所研究的蛋白中,不少蛋白存在核轉位的情況, 也就是說當細胞培養的環境或者刺激的因素不同,該蛋白會出現從胞漿到細胞核的表達位置的改變。有時候表達不變僅僅是從胞漿轉位到細胞核,有時候還伴有表達的上調,比如nf-kb。
怎樣提取細胞質或細胞核中的蛋白
3樓:匿名使用者
細胞比較簡單,只有細胞膜,抽提過程中,很容易破壞細胞膜,從而得到蛋白,相應蛋白中受到其他物質干擾也比較少,樣品較為乾淨。
但是用組織的時候,組織由細胞組成,但是從組織中抽提丹巴就要複雜,做組織勻漿以後,再分離組織碎片和蛋白,但是分離過程可能沒有那麼好,組織中含有的各種雜質,雜蛋白就比細胞中要多,要複雜。因此選擇適當的方法提取組織蛋白,對於後續的western來說還是非常重要的,這也是為什麼細胞的蛋白做wb挺好,但是換到組織,可能有些條件就需要進一步優化了。
如何看蛋白是胞漿蛋白還是包膜蛋白
4樓:冰雪陽光久久
細胞總蛋白的提取.pdf (110.27k)非常感謝!
總蛋白提取最簡單的方法就是裂解液直接裂解細胞(或加入超聲)裂解液配方呢?誰能提供?我查到的好象是分開提的配方thh_hn wrote:
我預提取細胞株總蛋白,查閱相關資料顯示有胞漿蛋白和膜蛋白的提取方法,請問哪位大俠能告訴我,胞漿蛋白就是總蛋白嗎?或者胞漿蛋白和膜蛋白才統稱為總蛋白?
胞漿是指cytosol,嚴格的講,是指細胞質(cytopla**)除去細胞器的部分,因此不僅不包括核與細胞膜,而且不包括線粒體、內質網等細胞器
不過這是針對細胞學說的,對於生化研究習慣上把細胞質除去核的部分叫做胞漿,公司賣的cytosol protein kit也是隻把細胞核去掉而已。
怎麼證明蛋白質是在細胞核中還是細胞質中表達 5
5樓:匿名使用者
同位素標記氨基酸(如n15),然後結合熒游標記confocal定位細胞核,細胞質
6樓:匿名使用者
可以用上海生工的bsp001提取,再western blot鑑定
7樓:匿名使用者
放射性標記氨基酸或熒游標記
8樓:宇文元修宛辛
生物體中到處都有蛋白質,蛋白質是生命運動的基礎
細胞核裡有和dna結合生成染色體的蛋白質,細胞質中有維持生命活動的蛋白質,而且生物體中還有無處不在的酶,這些都是蛋白質。而且,汗液中有蛋白質,唾液中有蛋白質,你說**沒有後蛋白質呢?
請問提取細胞核蛋白和漿蛋白提取方法上有什麼不同嗎?是否還可以用actin等常用內參?
9樓:左京壽美子
可以, actin/tublin/gapdh,都行,因為,目標的胞漿蛋白,但是,現在的技術是無法獲取完全的胞漿蛋白,還是要用總蛋白,既然要用總蛋白,那麼,以上提到的內參都行、
如何證明脲酶是蛋白質,如何證明酶是蛋白質?
用蛋白質特有的顯色方法,如測紫外吸光值 雙縮脲反應 跑電泳後染色等.脲酶與尿素混合,用康維皿吸收放出的氨,再檢測。脲酶的作用是催化尿素水解為氨和二氧化碳。脲酶普遍存在於高等植物 細菌 真菌和藻類中。脲酶的種類很多,不同種類脲酶的含鎳量不同。1926年薩姆納成功地分離出一種脲酶活性很強的蛋白質。這是生...
如何對細胞培養液中的蛋白打蛋白質譜
最好先做一步蛋白富集,而後做質譜。否則樣品濃度太低了 為什麼講生物質譜是蛋白質組學研究的主要工具 蛋白質組學 proteomics 研究生物質譜技術 對分離的蛋白質 進行鑑定是蛋白質組研究的重要內容,蛋白質微量測序 氨基酸組成分析等傳統的蛋白質鑑定技術不能滿足高通量和高效率的要求,生物質譜技術是蛋白...
如何證實細胞膜上兩個蛋白的位置關係
證實兩個蛋白在細胞膜上都有定位有許多種方法 1,熒光報告基因 兩個蛋白各自用熒光蛋白標記,比如gfp和rfp等,兩者熒光光譜不可重疊,在共聚焦顯微鏡下在各自通道觀察和merge後的影象分析,可見熒光重疊,即可證明共定位。2,免疫熒光 要求兩個蛋白都有抗體,或者帶有不同的標籤,如myc,flag等,然...