細胞培養液上清和血液中的細胞因子有區別嗎

2021-05-30 18:15:46 字數 693 閱讀 6870

1樓:我哩歲月

有區別。細胞培養液是一種含有細胞分泌蛋白和死細胞的細胞培養液,而細胞因子是免疫反應、造血和炎症反應產生和維持所必需的蛋白質類物質。

eg:細胞因子,是檢測培養液中的蛋白還是細胞抽提物

2樓:

你不妨對細胞內外的蛋白都做一個檢測,但是檢測細胞外的蛋白比較麻煩。因為培養基的成分本身很複雜。等細胞長滿後用完全培養基培養24小時,然後用pbs洗兩遍,加hepes溶液,使細胞覆蓋就行。

培養2-3天收集培養液離心,濃縮上清至原體積的1/30-1/10,然後做western檢測。如果還檢測不出來就用上述液做個免疫沉澱,然後做western。但這樣就誤差太大,基本看不出來變化。

所以建議:(1)以細胞內的蛋白做,刺激時間不要過長。(2)用表達量與此蛋白有直線相關的其他蛋白來代替,比如其訊號通路上下游的一些激酶之類的。

做細胞上清的elisa,培養液的顏色有影響麼

3樓:南京金益柏生物科技****

沒有影響,最後讀值時的吸收值和你細胞培養液顏色又不是一個步驟

有用細胞培養液的上清做western的嗎

4樓:匿名使用者

沒有影響,最後讀值時的吸收值和你細胞培養液顏色又不是一個步驟

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