1樓：一日不見兮
其一,確認細胞的抗原是內源的還是外源的?
其二,組織表達丰度低?抗體能做if?
懸浮細胞怎樣做wb
2樓：匿名使用者
和貼壁細胞差不多，就是要離心收集細胞而已，然後就裂解，後面都一樣
上丁香園、生物秀論壇看看，裡面有很詳細的教程
細胞蛋白wb可以做出來，但免疫熒光做不出來是為什麼
3樓：高保真生物
正常，wb檢測限本來就靈敏，免疫熒光做不出來原因很多。首先你要確定你蛋白表達的水平，皮克級還是納克級？再確定免疫熒光的檢測限，然後再一步一步分析原因。
高保真生物技術****~~~實驗整體外包服務商~
怎麼從懸浮細胞中提取蛋白做wb
4樓：匿名使用者
細胞比較簡單，只有細胞膜，抽提過程中，很容易破壞細胞膜，從而得到蛋白，相應蛋白中受到其他物質干擾也比較少，樣品較為乾淨。
但是用組織的時候，組織由細胞組成，但是從組織中抽提丹巴就要複雜，做組織勻漿以後，再分離組織碎片和蛋白，但是分離過程可能沒有那麼好，組織中含有的各種雜質，雜蛋白就比細胞中要多，要複雜。因此選擇適當的方法提取組織蛋白，對於後續的western來說還是非常重要的，這也是為什麼細胞的蛋白做wb挺好，但是換到組織，可能有些條件就需要進一步優化了。
wb在組織裡做不出來而細胞裡能做出來怎麼回事
5樓：匿名使用者
其一，確認細胞的抗原是內源的還是外源的？
其二，組織表達丰度低？抗體能做if？
做wb，直接收集細胞沉澱凍起來可以嗎
6樓：聽風
做wb，可以直接收集細胞沉澱凍起來，以備下一步實驗所用。
蛋白質印跡法（免疫印跡試驗）即western blot。它是分子生物學、生物化學和免疫遺傳學中常用的一種實驗方法。其基本原理是通過特異性抗體對凝膠電泳處理過的細胞或生物組織樣品進行著色。
通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質在所分析的細胞或組織中表達情況的資訊。比如加藥物處理的貼壁細胞總蛋白的提取。
由於受藥物的影響，一些細胞脫落下來，所以應收集培養液中的細胞。以下是培養液中細胞總蛋白的提取：
① 將培養液倒至15ml離心管中，於2500rpm離心5min。
②棄上清，加入4ml pbs並用槍輕輕吹打洗滌，然後2500rpm離心5min。棄上清後用pbs重複洗滌一次。
③用槍洗幹上清後，加100 μl裂解液（含pmsf）冰上裂解30min，裂解過程中要經常彈一彈以使細胞充**解。
④將裂解液與培養瓶中裂解液混在一起4℃、12000rpm離心5min，取上清分裝於0.5ml離心管中並置於－20℃儲存。
由於第一次做western blot ，想請教一個問題，在做wb之前要對培養細胞中的蛋白質進行提取，也就是用裂解
7樓：白羊阿拉阿拉
蛋白提取時使用蛋白裂解液將細胞裂解，然後離心分為上清液和下層沉澱，如果你說的是這個上清液的話，那麼這個上清液是細胞中的可溶性蛋白，一般包括細胞質的蛋白和細胞核的可溶性蛋白，下層沉澱主要是細胞碎片以及不可溶的蛋白以及染色質之類的東西。
8樓：匿名使用者
上清液檢測的分泌蛋白 用的是elisa檢測 細胞裂解液檢測的是胞內蛋白含量。。。。
請問蜜蜂在蜂箱裡不出來是得了什麼病
幼蜂是不是沒有翅膀或翅膀有畸形 如果是那麼你這可能是滿害 要注意 好好治治了 蜜蜂為什麼從蜂箱跑到蜂箱外邊不進去 蜜蜂從蜂箱裡跑到了蜂箱外面。應該是太熱了，蜱箱不通風導致的。需要把蜂箱移至陰涼處，加強通風。如果是夏天在外邊很正常，因為，蜂箱裡面太熱 蜜蜂會得哪些病 蜜蜂病蟲害的種類較多。歸納起來有由...
在WPS版裡新增背景顏色為什麼列印不出來
以wps 2019版本為例 關於在wps版word裡新增背景顏色為什麼列印不出來，您可考慮使用wps2019版本完成操作，具體步驟如下 1 開啟 文字 word 文件 2 點選左上角 檔案 選項 列印 3 將 列印背景色和影象 選項勾選上即可 如不需要列印背景取消勾選即可 在 word 的預設設定中...
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如果是恆牙長不出來的話，可以去口腔醫院做個牙齦切開手術。就是在牙齦處劃一刀，切開個小口子，這樣才能使恆牙順利萌出。因為牙齦有時候太厚了，阻礙了牙齒的萌出。口腔科醫生低調路過 望採納。我有一顆牙齒在牙齦里長不出來，但是一直沒有什麼異樣，也沒什麼感覺，可以不做手術嗎，求專業人士解答，如果不做手術的話，在...