石蠟切片製作過程
1樓:小浮生歇
石蠟切片製作過程如下:
切削很困難,而且無法得到十分菲薄的切片,因此必須先用某些特殊物質滲入組織塊的內部起支援作用,並將整個組織塊包住,然後再用精密的切片機制作切片,才能獲得良好的效果。
這種方法稱為包埋法,包埋的物質稱為包埋劑。常用的包埋劑有石蠟、火棉膠、炭蠟、明膠等,水和塑料也可作為包埋劑。根據包埋劑的不同,分別有石蠟切片、火棉膠切片、冰凍切片等,它們各握姿有長處,可以根據需要選用,但是使用得最多的還是石蠟切片技術。
石蠟作為包埋劑,有其獨特的優點,例如:石蠟能切出極薄的蠟片(2~10μm);切片時能連成蠟帶,便於製作連續切片;操作較容易,組織塊可以包埋在石蠟中長期保姿皮燃存。<>
然而石蠟切片的製作過程較長,步驟很多,一步不慎往往導致前功盡棄,而且這些處理引起組織塊或多或少地收縮,切片時受溼度影響比較大,這些不足之處必須在製片過程中認真對待,儘量減小它的不良影響。
石蠟切片的製作過跡虛程主要包括:取材,固定,脫水,透明,透蠟,包埋,切片,貼片,染色,透明,封藏等步驟。
石蠟切片的製作過程
2樓:波斯貓
石蠟切片的製作過程
1、組織包埋。
1)乙醇脫水:組織經不碼纖同濃度的乙醇溶液進行逐級脫水%,各級乙醇 40min(注意:骨性及鈣化組織需在jybl-ⅱ脫鈣液中浸泡24h,待組織軟化後再進行乙醇脫水步驟);
2)透明:組織依次浸泡於三個二甲苯中,每缸各1h;
3)浸蠟:組織依次浸泡於三個石蠟缸中,每缸各1h;
4)包埋:將液態的石蠟倒入模具盒中,再將浸好蠟的組織塊平放底部,注意切面方向朝下放置,待石蠟凝固後去掉包埋框,完全冷卻變硬後再修整蠟塊,組織外圍的石蠟保留適中以便切片。
2、切片製作將預冷的蠟塊固定在石蠟切片機上,使蠟塊的切面與刀口成平行方向,刀的傾斜度通常15℃,轉動輪轉推進器,調節切片厚度為 4μm,切成厚度均勻的切片。
左手持毛筆,右手旋動切片機轉把,切片帶出來之後,用毛遲慧仿筆輕輕托起,再用鑷子輕鑷蠟片,以正面放入展片箱中,其水溫 45℃左右。待攤平整後撈片。貼附切片左手持載玻片之一端,垂直入水去附貼切片,右手用鑷子輔助推動,附貼至玻片上的三分之二處。
切片貼附後,放在空氣中稍晾乾,放置 65℃烤片機上烤1h,再放置烘箱內烘烤2h。
3、石蠟切片脫蠟至水。
依次將石碧飢蠟切片放入二甲苯ⅰ10min-二甲苯ⅱ10min-二甲苯ⅲ10min-無水乙醇ⅰ5min-無水乙醇ⅱ5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-50%酒精5min梯度脫蠟。
4、he染色。
石蠟切片入蘇木素染分鐘min,自來水漂洗,1%鹽酸酒精分化數秒,自來水漂洗,然後1%氨水水溶液返藍1min,流水沖洗數秒,放入伊紅染液中染色數秒,流水漂洗。
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