革蘭氏染色步驟是什麼?
1樓:帳號已登出
革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復染等四個步驟,具體操作方法是:
1、塗片固定。
2、草酸銨結晶紫染1分鐘。
3、蒸餾水沖洗。
4、加碘液覆蓋塗面染約1分鐘。
5、水洗,用吸水紙吸去水分。
6、加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色,20秒後水洗,吸去水分。
7、蕃紅染色液(稀)染1分鐘後,蒸餾水沖洗。乾燥,鏡檢。
原理
通過結晶紫初染和碘液媒染後,在細胞壁內形成了不溶於水的結晶紫與碘的複合物,革蘭氏陽性菌由於其細胞壁較厚、肽聚糖網層次較多且交聯緻密,故遇乙醇或丙酮脫色處理時,因失水反而使網孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會出現縫隙;
因此能把結晶紫與碘複合物牢牢留在壁內,使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯度差,在遇脫色劑後,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而鬆散的肽聚糖網不能阻擋結晶紫與碘複合物的溶出,因此通過乙醇脫色後仍呈無色,再經沙黃等紅色染料復染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
以上內容參考:百科-革蘭氏染色。
革蘭氏染色簡介
2樓:張三**
1 拼音戚兆。
2 註解 gé lán shì rǎn sè
革蘭氏染色是最常用的細菌鑑別染色法之一。未經染色之細菌,由於其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色後細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特徵,而用以分類鑑定。
革蘭氏染色屬復染法,即將標本固定後,先用龍膽紫染色,加碘液媒染後用酒精脫色,再用稀釋復紅復染。染色後除可以看到細菌形態外,還可將細菌分為兩大類,即不被酒精脫色而保留紫色者為革蘭氏陽性菌(g )。被酒精脫色復染成紅色者為革蘭氏陰性菌(g)。
革蘭氏染色原理尚不肯定,可能與細菌所帶核糖核酸、細菌壁結構通透性、等電點等因素有關。致病菌如金黃色葡萄球菌、綠色溶血性槐態鏈球菌、肺炎球菌、白喉桿菌、碳疽桿菌等屬革蘭氏染色陽性菌。百日咳桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、痢疾桿菌、霍亂弧菌、流行性腦高明租膜炎雙球菌、淋病雙球菌等均屬革蘭氏陰性。
所以根據細菌的革蘭氏染色性質,可以縮小鑑定範圍,有利於進一步分離鑑定,以對疾病做出診斷。又由於各種抗生素的抗菌譜不同,革蘭氏染色尚可做為選用抗生素的參考。
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