crisprcas9的技術優缺點

2021-12-20 03:52:13 字數 791 閱讀 7842

1樓:匿名使用者

優點:使用方便,構建簡單,可以覆蓋大多數區域的基因編輯需求,成本低。

缺點:質粒仍然較大,轉染難度相對較大。具有鹼基識別偏好性,侷限了基因編輯的運用範圍,而且會導致不同基因位點編輯效率不同。篩選仍然需要較大工作量。

什麼是crispr/cas9技術

2樓:炸飛的少年

crispr/cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)是最新出現的一種由rna指導的cas9核酸酶對靶向基因進行編輯的技術。crispr/cas9是細菌和古細菌為應對病毒和質粒不斷攻擊而演化來的獲得性免疫防禦機制。在這一系統中,crrna(crispr-derived rna)通過鹼基配對與tracrrna(trans-activating rna)結合形成雙鏈rna,此tracrrna/crrna二元複合體指導cas9蛋白在crrna引導序列靶定位點切斷雙鏈dna(圖2)。

在基因組編輯過程中,tracrrna和crrna可以融合成為1條rna(sgrna)表達同樣可以起到靶向剪下的作用。crispr/cas9的優點是操作簡單,對基因組的效率高。需要對某一個靶位點編輯的時候,只需要表達相應的sgrna即可,不需要對cas9核酸酶進行改造。

它可對任何物種的基因組進行高效率的定向編輯。基因組編輯技術的一個缺點是脫靶效應,可能在靶點以外的地方切斷dna,產生indel。本公司用一個突變的cas9酶 cas9n克服了這個侷限,,它只切斷dna的一個鏈,這個單鏈缺口會促進同源重組,但不會產生脫靶突變。

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