Triozl大量提取RNA，該加氯仿時加成無水乙醇，還有的救嗎

1樓：匿名使用者

可以。因為提取原理是用氯仿萃取rna，而rna不溶於酒精，但氯仿和酒精胡溶。可行的辦法是用大量的氯仿萃取，減少酒精的干擾，最後再用異丙醇沉澱。

rna提取的時候無水乙醇，75%乙醇，氯仿有哪些作用

2樓：北京索萊寶科技****

氯仿: rna脫離dna及蛋白，從混合液中層析到水相.水相中的rna可用異丙醇沉澱濃縮.

接著用異丙醇進行二次沉澱，隨後用乙醇洗滌沉澱，可去除所有殘留的蛋白質和無機鹽. rna樣品中如果含有無機鹽, 有可能對後續實驗操作中的一些酶促反應產生抑制作用。

3樓：夏侯雪經霜

提rna時加完氯仿忘記靜置會怎樣

4樓：匿名使用者

提rna時加完氯仿忘記靜置會不分層。

氯仿是分子量比較大的有機溶劑，在提取rna時氯仿可以有效的使有機相和無機相迅速分離。提rna時加完氯仿靜置時間短會導致分層不明顯，忘記靜置會不分層。

提rna時trizol使樣品勻漿化，細胞裂解，溶解細胞內含物，同時因含有rnase抑制劑可保持rna的完整性，在加入氯仿離心後，溶液分為水相和有機相，rna在水相中，取出水相用異丙醇沉澱可**rna；用乙醇沉澱中間層可**dna；用異丙醇沉澱有機相可**蛋白質。

rna提取原理

5樓：追尋複製者

rna抽取一般使用trizol法抽來提:

trizol是一種總自rna抽提試劑，內含異bai硫氰酸胍等物質，能du

迅速裂解細zhi胞，抑制細胞釋

dao放出的核酸酶活性。目前常用trizol法進行提取組織或細胞中的rna。

trizol作用原理:

在勻質化或溶解樣品中，trizol試劑可保持rna的完整性，同時能破壞細胞及溶解細胞成分。加入氯仿離心後，裂解液分層成水相和有機相。rna存在於水相中。

水相轉移後，rna通過異丙醇沉澱**。移去水相後，用乙醇可從中間相沉澱得到dna，加入異丙醇沉澱可從有機相得到蛋白質。

6樓：匿名使用者

dna不是單獨存在於細胞中的，是染色體

蛋白質是有機物沒錯，但是它是複雜的有機物，有親水基，疏水基，所以不是只要是有機物就溶於有機溶劑的

分層看的是密度，不是分子量的大小

7樓：《不能說的祕密

蛋白質在有機溶劑中復變性所以形成

制沉澱，中間那白bai色的是變性du的蛋白質。

我們做過zhi提取dna的實驗，dao用的是飽和酚提取的，後來又用了氯仿的。dna、rna很容易被分解，特別是rna，rna酶到處都有，我們在做dna提取時用到edta抑制dna酶的活性，防止被降解。

分層不是看分子的大小的，看它在離心力的作用下運動的快慢，一般密度大的運動的快一些在下面。

下層有機相中有一些脂類

rna提取過程中氯仿萃取之後加無水乙醇析出沉澱太多，漂洗離心時，上述部分沉澱無法溶解，為什麼呢？

8樓：暮秋陽光

加完氯仿是用異丙bai醇析出rna，我們

du是用75%的乙醇zhi（用depc水來配）dao洗滌，乙醇是去各版種離子的，無水乙醇不能權去除離子，洗完之後一定要完全晾乾，然後加入適量的depc水，在60度中水浴，直至溶解，如果部分沉澱不能溶解，那可能是含有其他物質，你可以將溶解的部分吸到另一個滅菌的管子中，這部分應該是會有溶解有rna的。