1樓:匿名使用者
根據培養細菌的目的和培養物的特性培養方法分為一般培養法,二氧化碳培養法和厭氧培養法三種.
1. 一般培養法 將已接種過的培養基,置37℃培養箱內18-24小時,需氧菌和兼性厭氧菌即可於培養基上生長.少數生長緩慢的細菌,需培養3-7天直至一個月才能生長.
為使培養箱內保持一定溼度,可在其內放置一杯水.培養時間較長的培養基,接種後應將試管口塞棉塞後用石臘凡士林封固,以防培養基幹裂.
2. 二氧化碳培養法 某些細菌,如牛流產布氏桿菌和胎兒弧菌等需要在含有10%二氧化碳的空氣中才能生長,尤其是初代分離培養要求更為嚴格.將已接種的培養基置於二氧化碳環境中進行培養的方法即二氧化碳培養法,常用方法有以下幾種:
(1) 二氧化碳培養箱 可將已接種的培養基直接放入箱內孵育,即可獲得二氧化碳環境.
(2) 燭缸法 將已接種的培養基,置於容量為2 000ml的磨口標本缸或乾燥器內.缸蓋或缸口處均需塗以凡士林,然後點燃蠟燭直立置入缸中,密封缸蓋.待燃自行熄滅時,容器內約含5-10%的co2 容器置37℃培養.
(3) 重碳酸鈉-鹽酸法 每升容積的容器內,重碳酸鈉與鹽酸按0.4g與3.5ml的比例,分別將兩種藥各置一器皿內(如平皿內),連同器皿置於標本缸或乾燥器內,蓋嚴後使容器傾斜,兩種藥品接觸後即可產生二氧化碳.
3. 厭氧培養法 目前常用的厭氧培養方法有厭氧罐法,氣袋法及厭氧箱三種.
(1) 厭氧罐法 是目前應用較廣泛的一種方法,共分為以下幾種.
抽氣換氣法:該法適用於一般實驗室,其特點是較經濟並可迅速建立厭氧環境.標本接種後,將平板放入厭氧罐,擰緊蓋子,用真空泵抽出罐中空氣,使壓力真空表至-79.
98kpa,停止抽氣,充入高純氮氣使壓力真空表指標回0位,連續反覆3次,最後在罐內-79.98kpa的情況下,充入70%的n2 ,20%h2 ,10%co2 (有人改用20%co2 及80%h2 ,亦可獲得好結果).罐中需放入冷催化劑鈀粒,可催化罐中殘餘的o2 和h2 化合成水.
同時罐中應放有美藍指示管,美藍在有氧的環境下呈藍色,無氧時為紅色.臨用前首先將美藍煮沸使變成無色,放入罐中先呈淺藍色,待罐中無氧環境形成,美藍即可持續無色.
氣體發生袋法:氣體發生袋系由錫箔密封包裝,其中含有兩種藥片,一種為含枸椽酸和重碳酸氫鈉的藥片,另一種是含有硼氫化鈉的藥片.前者遇水放出二氧化碳,後者可釋放氫.
使用時在袋的右上角剪一小口,灌進10ml蒸餾水,立即放入含有鈀粒,指示劑及平板培養基的厭氧罐中,擰緊蓋子經2-3分鐘後,可感到蓋子微熱並有少量水蒸氣出現.密封后1小時左右罐中的o2 的含量可低於<1%.
(2) 氣袋法 此種方法不需要特殊裝置,操作簡單,使用方便,不但實驗室中可用,而且外出取樣,現場接種也可用.原理與氣體發生袋完全相同,只是採用塑料袋代替了厭氧罐,氣袋為一透明而密閉的塑料袋,內裝有氣體發生安瓿,指示劑安瓿,含有催化劑的帶孔塑料管各一支.其操作方法為首先將接種的平板培養基放入袋中,用彈簧夾夾緊袋口,然後用手指壓碎氣體安瓿,20分鐘後再壓碎指示劑安瓿,如果指示劑不變藍色,說明袋內達到厭氧狀態,即可放入37℃進行培養.
(3) 厭氧培養箱 使用之前須仔細檢查厭氧裝備有無漏氣等問題,以及催化劑,指示劑質量等.使用時嚴格遵守操作規程,保證箱內氣體比例合理.
2樓:
培養細菌的要素:適合培養基,培養方法和無菌操作培養基:最簡單,最常用的就是細菌肉湯培養基培養基,也稱lb培養基。
聽這個名字,顧名思義,就是絕大多數的可培養細菌(還有不可培養細菌,或者稱未培養細菌,自然界中僅有1%不到的細菌能被我們培養出來)都能在這個培養基上培養出來。
lb的好處是能培養絕大多數可培養細菌,但是他的確定是沒有初步鑑定能力,如果需要初步鑑定的話可以選擇一些顯色培養基
培養方法,一般情況下分需氧和厭氧兩種;
下面簡述需氧型細菌培養:
將你要培養細菌的器材、試劑、培養基等拿去滅菌(是滅菌不是消毒)並烘乾;然後準備超淨工作臺,酒精棉等,將要培養的細菌用移液器(液體保種)、滅菌牙籤、接種環等物(注意不要用手直接拿)接種到培養基中。液體和半液體培養基正置培養,固體培養基倒置培養。放入培養箱中。
有什麼不懂直接問吧,可能描述的不好....
怎麼做細菌培養?
3樓:
培養細菌的要素:適合培養基,培養方法和無菌操作培養基:最簡單,最常用的就是細菌肉湯培養基培養基,也稱lb培養基。
聽這個名字,顧名思義,就是絕大多數的可培養細菌(還有不可培養細菌,或者稱未培養細菌,自然界中僅有1%不到的細菌能被我們培養出來)都能在這個培養基上培養出來。
lb的好處是能培養絕大多數可培養細菌,但是他的確定是沒有初步鑑定能力,如果需要初步鑑定的話可以選擇一些顯色培養基
培養方法,一般情況下分需氧和厭氧兩種;
下面簡述需氧型細菌培養:
將你要培養細菌的器材、試劑、培養基等拿去滅菌(是滅菌不是消毒)並烘乾;然後準備超淨工作臺,酒精棉等,將要培養的細菌用移液器(液體保種)、滅菌牙籤、接種環等物(注意不要用手直接拿)接種到培養基中。液體和半液體培養基正置培養,固體培養基倒置培養。放入培養箱中。
有什麼不懂直接問吧,可能描述的不好....
如何做細菌培養基。詳細材料及步驟有那些 ? 10
4樓:逍傲雪
一般都會用營養瓊脂(na),可以直接買成品培養基,如果非得自己做的話,主要成分
蛋白腖 10g
牛肉膏 3g
氯化鈉 5g
瓊脂 15~20g
蒸餾水 1000ml
製法將除瓊脂以外的各成分溶解於蒸餾水內,加入15%氫氧化鈉溶液約2ml,校正ph至7.2~7.4。加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min。
注:此培養基可供一般細菌培養之用,可傾注平板或製成斜面。如用於菌落計數,瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,則應為2%。
液體培養基就不要加瓊脂了
5樓:男人太億
將除瓊脂以外的各成分溶解於蒸餾水內,加入15%氫氧化鈉溶液約2ml,校正ph至7.2~7.4。加入瓊脂,加熱煮沸,使瓊脂溶化。分裝燒瓶,121℃高壓滅菌15min。
注:此培養基可供一般細菌培養之用,可傾注平板或製成斜面。如用於菌落計數,瓊脂量為1.5%;如作成平板或斜面,則應為2%。
有一種藥品叫做營養瓊脂,這種藥品是廠商配製好的營養瓊脂,可以加水後直接製作培養基,不需要自行配製。此種藥品有的已經調好ph,這一點需要注意。
6樓:諭神之左手
首先,根據需要確定培養基形態(液態或固態)
其次,根據培養物件及目的選擇培養基配方,並按要求選擇藥品並配置後進行滅菌分裝。
具體培養,因培養細菌目的不同和種類不同有所區別,可以根據需要自行搜尋。
7樓:小婉
先將標本接種於固體培養基上,做分離培養。再進一步對所得單個菌落進行形態、生化及血清學反應鑑定。培養基常用牛肉湯、蛋白腖、氯化鈉、葡萄糖、血液等和某些細菌所需的特殊物質配製成液體、半固體、固體等。
一般細菌可在有氧條件下,37℃中放18~24小時生長。厭氧菌則需在無氧環境中放2~3天后生長。個別細菌如結核菌要培養1個月之久。
由於細菌無處不在,因此從製備培養基時開始,整個培養過程必須按無菌操作要求進行,否則外界細菌汙染標本,會導致錯誤結果;而培養的致病菌一旦汙染環境,就會引起交叉感染。
以疾病診斷為目的進行的培養,要選擇合適的標本(血、尿、便、膿液、分泌物等),並應結合臨床情況解釋所得結果。
8樓:匿名使用者
以大腸桿菌為例吧~~先製作培養基,用瓊脂和營養物質,瓊脂加熱融化,按比例放入營養物質,冷卻至瓊脂凝固,用接種環沾取菌樣,在培養基上劃線,放在37度培養箱培養。
細菌培養基有哪些營養型別,細菌培養基有哪些營養型別?各有什麼特點?
1 天然培養基 成本低 可在實訓室使用亦可進行工業上大規模的微生物發酵.2 合成培養基 成本高 微生物在其中生長較慢 適用於實訓室用來進行有關微生物營養需求,代謝,分類鑑定,生物量鑑定,菌種選育及遺傳分析等方面的研究工作.細菌培養基有哪些營養型別?各有什麼特點?1 天然培養基 成本低 可在實訓室使用...
請問細菌培養基為何氮源高反而菌體生長慢呢
培養基的一個重要引數是碳氮比,注意細菌的供能物質來自碳源,當氮源高時相對碳源低,細菌沒有充足能量合成蛋白質和進行生命活動,生長也就慢了 培養基碳氮比適當的時候才能生長迅速 我是這樣認為的,但不一定正確。通常培養基中的氮源大都是用含氮無機鹽,量加多了,造成培養基離子濃度過高,可能會影響某些物質的跨膜運...
產生標準菌落的細菌的最初數目和培養基分別是
答案c在液體培養基中生活的細菌,無論是一個還是許多,肉眼都是不可見的。在固體培養基上的細菌,當數目較少時也是不可見的。當固體培養基上有許多細菌並且集中在較小範圍時,肉眼才可見,菌落就是這樣的情況。菌落是一個或少數幾個細菌的子細胞形成的子細胞的群體,形成於固體培養基上,有一定的形態結構,肉眼可見。菌落...