1樓:晴晴
葉綠素不穩定,易被破壞
,時間過長或研磨不充分都會導致色素的量太少而使實驗失敗。
參考:實驗——綠葉中色素的提取和分離
綠葉中色素的提取和分離:
1、原理
(1)各種色素能溶解在有機溶劑(無水乙醇等)中形成溶液,使色素從生物組織中脫離出來。
(2)各種色素都能溶解在層析液中,但在層析液中的溶解度不同。溶解度大的色素分子隨層析液在濾紙上擴散得快,反之則慢,因而不同色素可以在濾紙上通過擴散分開,各種色素分子在濾紙上可形成不同的色素帶。
實驗過程:
觀察結果:濾紙條上色素帶有四條,由上到下分別是胡蘿蔔素、黃色的葉黃素、藍綠色的葉綠素、黃色的葉黃素、藍綠色的葉綠素a、黃綠色的葉綠素b。
實驗要點及注意事項:
1、實驗中幾種化學藥品的作用
①加入少量sio2,可破壞細胞結構,使研磨更充分,便於色素完全釋放。
②加入少量caco3,,可以中和細胞內的有機酸,防止有機酸奪取葉綠素中的鎂離子使葉綠素破壞,從而起到保護色素的作用。但sio2.和caco3的加入量要少,否則濾液雜質多、混濁、顏色淺,實驗效果差。
2、實驗成功的關鍵
①葉片要新鮮,顏色要深綠,保證色素的含量。
②研磨要迅速充分。葉綠素不穩定,易被破壞,時間過長或研磨不充分都會導致色素的量太少而使實驗失敗。
③濾液細線不僅要求細、直、均勻,而且要求含有較多的色素(可以重複畫二至三次)。
④濾液細線不能觸及層析液,否則色素溶解到層析液中,將得不到清晰的色素帶。
3、注意事項
①製備濾紙條時,要剪去兩角,這樣可以減小邊緣效應,使色素在濾紙上擴散均勻,便於觀察實驗結果。
②收集濾液後,要及時用棉塞將試管口塞緊,防止濾液揮發。
4、濾紙條上的濾液細線,不能觸及層析液的原因:濾紙條上的濾液細線如觸及層析液,濾紙上的葉綠體色素就會溶解在層析液中,實驗就會失敗。
5、提取和分離葉綠體色素的關鍵:
(1)提取葉綠體色素的關鍵是:①葉片要新鮮、濃綠;②研磨要迅速、充分;③濾液收集後,要及時用棉塞將試管口塞緊,以免濾液揮發。
(2)分離葉綠體色素的關鍵是:①是濾液細線要細且直,而且要重複劃幾次;②是層析液不能沒及濾液線。
6、收集到的色素濾液綠色過淺,可能原因如下:
①未加二氧化矽,研磨不充分。
②使用放置數天的菠菜葉,濾液中色素(葉綠素)太少,綠色過淺。
③一次加入大量的95%的乙醇,提取濃度太低(正確做法:分次加入少量95%的乙醇提取色素)。
④未加碳酸鈣或加入過少導致色素分子被破壞。
7、如果濾紙條色素帶重疊,原因可能是濾紙條上的濾液細線接觸到層析液。
在做葉綠體提取和分離中為什麼二氧化矽有助於研磨得充分,碳酸鈣可防止研磨中色素被破壞
二氧化矽可以將細胞充分磨碎,讓葉綠素提取量更多。葉綠素分子結構中含有一個鎂原子,當細胞破裂時,細胞液內有機酸中的氫離子可取代鎂原子而成為褐色的去鎂葉綠素,碳酸鈣可中和有機酸的氫離子以防止去鎂反應的發生。二樓的回答得專業,贊一個!這個問題當年的奧賽學習時看到過,保證是對的!這個問題,當初也讓我很是疑惑...
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