1樓：匿名使用者
- fl2-w是隻檢測熒光的脈衝寬度, fl2-h是指脈衝高度. 通常在做細胞週期分析時
流式細胞術散點圖引數中fsc-a與fsc-h是什麼意思
2樓：就醬挺好
fsc代表的是forward scatter，這個引數和細胞的大小成正比，a是area的縮寫，h是height的縮寫。這是機器在記錄訊號時所採用的引數（不顯示在使用者介面，在除錯機器的時候可以顯示）
每個細胞通過鐳射的時候，機器都會記錄一個波狀訊號（一個拱形的訊號），h就是這個拱的高度（代表的是訊號的強度），a就是這個拱的曲線下面積，代表訊號強度和細胞大小的關係。其實還應該有一個引數w，是width的縮寫，是這個拱的寬度，代表細胞通過鐳射束所花的時間。
不光是fsc，其他每一個通道都有這三個引數可以記錄。可以用其中的任何一個，根據實驗要求來作圖。機器就會根據設定顯示出最終的圖形了。
3樓：東水易寒
前向角散射，即fsc與細胞直徑平分正相關（大小），所以我們平時上機的時候，有時用fsc做閾值，排除碎片及其它顆粒，避免干擾。
側向角散射，即ssc是指與鐳射束正交90度方向的散射訊號，它對細胞膜、胞質、核膜的折射率更敏感，可以提供細胞內結構及顆粒性質的資訊
fl2-a ，fl2-w 中a和w的含義
fl2-h1024，fl2-h256 中h的含義，1024和256又代表什麼呢。
名詞「道數」是怎麼定義的？
w好像代表脈衝寬度，但是脈衝寬度反映的是細胞什麼特性呢？
h-脈衝高度反映細胞什麼特性呢？
好像你做的是細胞週期分析，
如果是，fl2－a代表的是熒光峰面積，反映了細胞dna含量（前提是用rnase處理去掉了rna）；
fl2－w代表的是熒光峰寬度，這個值可以區分單個細胞和雙聯體細胞；
下面的1024和256是定義資料檔案大小的（記得培訓時工程師這麼說的）
－h好像沒有什麼特殊含義 ，就是指這個通道了，
一般檢測那個通道的熒光就是選擇哪個－h，比如fsc－h，ssc－h，fl1－h等等
流式涉及的調節引數太多了，主要的有：
1.電壓
2.閾值
3.熒光補償
4.通道選擇：需要哪些通道、選擇面積/高度/寬度、線性/log
5.停止條件選擇
太多太多了
fl2-a代表fl2 area，fl2-h即fl2 height，通過這兩個引數，可以將粘連體排除出去，因為粘連體跟多倍體有相同的fl2-a，但是fl2-h遠遠大於正常細胞。
正確的設定是將fl2-a設定在200附近。當然，不設在200也可以，但是那樣會對日後的分析造成困難。200道是對週期分析最佳的引數。
fsc是前向角散射，一般代表細胞的體積，值越大代表細胞越大。
ssc是側向角散射，一般代表細胞的顆粒度，值越大代表細胞的顆粒度越大，顆粒度指細胞表面的皺摺度，細胞內亞細胞器、顆粒的數目等。
流式細胞儀測定細胞週期各時相的原理和基本步驟（不用說具體使用的量）
4樓：匿名使用者
在細胞培養液中加入模擬核苷酸edu （比較老的方法也可以用brdu）。培養一小時 後，更換為正常的培養液繼續培養。模擬核苷酸可以像天然核苷酸一樣被細胞攝取並整合入新合成的dna。
培養一段時間後（一般小於一個細胞週期），固定細胞。根據所使用模擬核苷酸的不同，使用不同的方法。edu，改變緩衝液的ph值，就會發出熒光。
而brdu則需用熒光抗體識別，需要對細胞膜和核膜進行通透處理。
再加入pi對dna染色。
在二維座標圖上，橫座標設為線性pi熒光強度，縱座標設為模擬核苷酸的熒光強度（log）。
典型的圖就像下面一樣：
g1, g2 和s期就按照圖中的劃分來做。g1期的細胞沒有新合成dna，所以brdu訊號是陰性，而pi的訊號位於1倍體期。s期是正在合成dna，所以brdu都是陽性。
g2期是已經合成好了2倍的dna，所以位於2倍體期，訊號是g1期的一倍。這個圖中，g1 pi訊號是300， g2就是600.
流式細胞儀測細胞週期圖怎樣分析
5樓：瀟灑的熱心網友
（1）細胞
培養bai
取對數生長du
期的細胞，按1x106個/ml以1ml體積zhi接種dao於6孔板內
。培養24h後，加入版不權同濃度樣品。在37 ℃、5 % 的co2恆溫箱中培養24h後終止。
（2）細胞固定
胰酶消化並離心收集細胞（800rpm/min），棄上清，用預冷pbs洗細胞兩次，加入預冷70％乙醇， -20℃固定儲存。
（3） 細胞染色
離心收集細胞（800rpm/min），以1ml的pbs洗細胞一次，加入500ulpbs含50ug/ml溴化乙錠（pi），100ug/ml rnase a, 4℃避光孵育20分鐘。
（4）檢測
以標準程式用流式細胞儀檢測，汞激發波長488nm，計數8千個細胞，結果用軟體winmdi version 2.9分析。
fl1在流式細胞術中是什麼意思？ 5
6樓：匿名使用者
流式細胞儀檢測時 首先需要激發光照射到相應的熒光素上 產生髮射光 檢測系統可以捕捉到發射光（也就是熒光） 一般來講現在激發波長都是488奈米 發射波長根據不同的熒光素而不同 熒光素 fitc、pe、pe-tr 的發射波長 分別為525、575、615奈米 當然還有其他熒光素，不一 一敘述。 fl1、fl2、fl3就是代表了各個通道 fl1對應著fitc 、fl2對應pe、fl3對應pe-tr，他們是按照發射波長從小到大來排列的。本人有多年流式使用經驗，有什麼問題可以繼續追問我。
7樓：鵬斯基
第一通道，發綠色熒光的fitc通道！
8樓：匿名使用者
fl1是第一個熒光通道的意思。也就是第一個顏色
急求流式細胞儀檢測細胞週期和細胞凋亡的結果圖6張
你是要這些圖來偽造資料吧。我看還是老老實實的做實驗吧。細胞週期和凋亡用流式細胞儀做都很簡單，全部試驗1 2天就全部搞定了。做研究還是要誠實為大 這沒什麼好參考bai價值的啊，你做不du 同的細胞出來的zhi 差異很大的，我做過dao 心臟和肝臟的，就內差別很大。容而且你做的染色和處理也是前提。一般凋...
流式細胞週期結果怎麼分析,如何看流式細胞週期結果圖？
細胞週期至少有兩種做法，最常見的如下圖分析 這個是brdu和7 aad方法檢測細胞週期。紅色的gate就是g1期，綠色的就是s期，橙色的就是g2 m期。brdu,pi,或者edu方法和這個一樣分析 如果單用pi等dna染料染色，需要專業軟體來分析計算了。比如這個圖，是dna染料單染，其中粉色部分是g...
如何分析流式細胞儀檢測t淋巴細胞亞群結果
最常見的是分析cd4，cd8亞群。先在fsc，ssc散點圖上劃出淋巴細胞gate。然後在此gate基礎上選取t細胞標誌染色陽性的細胞群 一般是cd3 在把cd34陽性的細胞根據cd4 和cd8染色情況形式為散點圖，得到cd4 cd8 cd4 cd8 以及雙陽性的比率。如果還有其他細胞標誌的染色，再進...