流式細胞週期結果怎麼分析,如何看流式細胞週期結果圖?

2021-03-19 18:27:18 字數 3904 閱讀 5482

1樓:匿名使用者

細胞週期至少有兩種做法,最常見的如下圖分析:

這個是brdu和7-aad方法檢測細胞週期。紅色的gate就是g1期,綠色的就是s期,橙色的就是g2/m期。brdu, pi, 或者edu方法和這個一樣分析

如果單用pi等dna染料染色,需要專業軟體來分析計算了。

比如這個圖,是dna染料單染,其中粉色部分是g1期,黃色部分是s期,綠色部分是g2/m期。中間的分佈一般是通過flowjo這樣的軟體計算自動生成的。

如何看流式細胞週期結果圖?

2樓:匿名使用者

博凌科為解答:流式細胞術在許多研究生課題中常用到,但對其結果的分析卻不是很清楚。在此收集點相關資料並以實驗中的一張**為例,大家共同學習。

圖中白色箭頭及尾部g1,g2,s是我用ps加上去的,方便討論。流式細胞術分析細胞週期結果示圖 首先來認識下圖:1、縱座標cell number:

即計數到的有效細胞數;2、橫座標dna content:即dna量,為什麼用dna量來區別各週期我們等下再講;3、g1、g2、s三期在上圖已經用箭頭標示;4、右側數字含義:mean g1=195.

4即g1期dna含量平均值為195.4;%g1=73.6即g1期細胞數佔總數的73.

6%;以此類推關於結果的具體分析我們會在接下來一起學習討論。主要從細胞週期的角度看各引數的意義:1、細胞週期指由細胞**結束到下一次細胞**結束所經歷的過程,所需的時間叫細胞週期時間。

可分為四個階段(見圖):① g1期(gap1),指從有絲**完成到期dna複製之前的間隙時間;② s期(synthesis phase),指dna複製的時期;③ g2期(gap2),指dna複製完成到有絲**開始之前的一段時間;④ m期又稱d期(mitosis or division),細胞**開始到結束。細胞週期圖示 2、從增殖的角度來看,可將高等動物的細胞分為三類:

①連續**細胞,在細胞週期中連續運轉因而又稱為週期細胞,如表皮生髮層細胞、部分骨髓細胞。②休眠細胞暫不**,但在適當的刺激下可重新進入細胞週期,稱g0期細胞,如淋巴細胞、肝、腎細胞等。③不**細胞,指不可逆地脫離細胞週期,不再**的細胞,又稱終端細胞,如神經、肌肉、多形核細胞等等。

細胞週期的時間長短與物種的細胞型別有關,如:小鼠十二指腸上皮細胞的週期為10小時,人類胃上皮細胞24小時,骨髓細胞18小時,培養的人了成纖維 細胞18小時,cho細胞14小時,hela細胞21小時。不同型別細胞的g1長短不同,是造成細胞週期差異的主要原因。

3、流式細胞結果圖各引數的意義:常用的流式細胞術分析細胞週期的方法是依據細胞dna含量(橫座標)來分析的:g1期:

細胞dna複製還沒有開始,也是dna含量最少的,即流式檢測結果圖的第一個峰;s 期:細胞開始複製,到完成複製,是一個一倍dna到二倍dna的過程,在流式結果圖中顯示期跨度特別大(第二個不高但很寬的峰);g2期:dna複製完成至**的一段時間,此時細胞內含二倍dna,在流式結果圖中的第二個峰;m期:

細胞**過程,此時細胞內也是二倍dna,用dna含量的方法是無法與g2期分開,所以有第三峰明顯升高時報告:g2/m期阻滯。

3樓:sks精品本本

g1期 s期 g2期各佔的比例啊

流式細胞儀檢測細胞週期dna含量結果圖怎樣分析和說明

4樓:匿名使用者

流式細胞儀檢測細胞週期dna含量結果圖怎樣分析和說明已經做完流式,看到結果卻不知該怎樣分析了。我用的是annexinv-fitc 凋亡試劑盒 ,annexinv/pi雙染檢測細胞凋亡。請教各位,凋亡散點圖中第1,2,4象限到底分別代表什麼細胞?

手裡的資料說法都不相同。試劑盒說明書:1代表細胞收集過程中機械性損傷的細胞,2 代表繼發性壞死細胞,4代表凋亡細胞。

有資料說:1代表壞死細胞,2代表晚期凋亡細胞,4代表早期凋亡細胞。我就不明白了,既然是凋亡,就算是晚期,細胞膜也會破壞?

還有的認為,2象限代表晚期凋亡和繼發性壞死的細胞。

我用的是美國beckman-coulter公司試劑盒,它的說明說上就是這麼寫的:

quadrant 3:viable cellsquadrant 4:apoptotic cellsquadrant 2:secondary necrotic cells

流式細胞儀測細胞週期圖怎樣分析

5樓:瀟灑的熱心網友

(1)細胞

培養bai

取對數生長du

期的細胞,按1x106個/ml以1ml體積zhi接種dao於6孔板內

。培養24h後,加入版不權同濃度樣品。在37 ℃、5 % 的co2恆溫箱中培養24h後終止。

(2)細胞固定

胰酶消化並離心收集細胞(800rpm/min),棄上清,用預冷pbs洗細胞兩次,加入預冷70%乙醇, -20℃固定儲存。

(3) 細胞染色

離心收集細胞(800rpm/min),以1ml的pbs洗細胞一次,加入500ulpbs含50ug/ml溴化乙錠(pi),100ug/ml rnase a, 4℃避光孵育20分鐘。

(4)檢測

以標準程式用流式細胞儀檢測,汞激發波長488nm,計數8千個細胞,結果用軟體winmdi version 2.9分析。

請教細胞週期分析原理和分析結果解釋

6樓:匿名使用者

博凌科為生物科技-為你解答:1、細胞週期指由細胞**結束到下一次細胞**結束所經歷的過程,所需的時間叫細胞週期時間。可分為四個階段(見圖):

① g1期(gap1),指從有絲**完成到期dna複製之前的間隙時間;② s期(synthesis phase),指dna複製的時期;③ g2期(gap2),指dna複製完成到有絲**開始之前的一段時間;④ m期又稱d期(mitosis or division),細胞**開始到結束。2、從增殖的角度來看,可將高等動物的細胞分為三類:①連續**細胞,在細胞週期中連續運轉因而又稱為週期細胞,如表皮生髮層細胞、部分骨髓細胞。

②休眠細胞暫不**,但在適當的刺激下可重新進入細胞週期,稱g0期細胞,如淋巴細胞、肝、腎細胞等。③不**細胞,指不可逆地脫離細胞週期,不再**的細胞,又稱終端細胞,如神經、肌肉、多形核細胞等等。細胞週期的時間長短與物種的細胞型別有關,如:

小鼠十二指腸上皮細胞的週期為10小時,人類胃上皮細胞24小時,骨髓細胞18小時,培養的人了成纖維細 胞18小時,cho細胞14小時,hela細胞21小時。不同型別細胞的g1長短不同,是造成細胞週期差異的主要原因。3、流式細胞結果圖各引數的意義:

前面講過,常用的流式細胞術分析細胞週期的方法是依據細胞dna含量(橫座標)來分析的:g1期:細胞dna複製還沒有開始,也是dna含量最少的,即流式檢測結果圖的第一個峰;s 期:

細胞開始複製,到完成複製,是一個一倍dna到二倍dna的過程,在流式結果圖中顯示期跨度特別大(第二個不高但很寬的峰);g2期:dna複製完成至**的一段時間,此時細胞內含二倍dna,在流式結果圖中的第二個峰;m期:細胞**過程,此時細胞內也是二倍dna,用dna含量的方法是無法與g2期分開,所以有第三峰明顯升高時報告:

g2/m期阻滯。上圖是dos系統下分析細胞週期的一個示意圖。不同的機器分析結果參數列示略有不同,但主要看g1、g2、s三個期的數值即可。

1、縱座標cell number:即計數到的有效細胞數;2、橫座標dna content:即dna量,為什麼用dna量來區別各週期我們等下再講;3、g1、g2、s三期在上圖已經用箭頭標示;4、右側數字含義:

mean g1=195.4即g1期dna含量平均值為195.4;%g1=73.

6即g1期細胞數佔總數的73.6%;以此類推

流式細胞儀結果圖如何看

7樓:匿名使用者

流式細胞儀檢測的都是相對熒光強度,因此一般都是用來比較兩個或以上樣本的熒光強度的差異。而熒光強度則是由熒游標記抗體或者其他熒光染料根據不同目的來選用的。

你可以貼一組具體的圖來,我可以給你一些指導。

急求流式細胞儀檢測細胞週期和細胞凋亡的結果圖6張

你是要這些圖來偽造資料吧。我看還是老老實實的做實驗吧。細胞週期和凋亡用流式細胞儀做都很簡單,全部試驗1 2天就全部搞定了。做研究還是要誠實為大 這沒什麼好參考bai價值的啊,你做不du 同的細胞出來的zhi 差異很大的,我做過dao 心臟和肝臟的,就內差別很大。容而且你做的染色和處理也是前提。一般凋...

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