做感受態的菌多長時間內可以使用,處於感受態的細菌細胞有何優點

2021-03-19 18:19:18 字數 1534 閱讀 9372

1樓:阿魯巴星人

感受態細菌放在-80,一般可以放一年左右。一般認為在剛做好的頭40天轉化效率最高。

感受態只能凍融一次,融化後在冰上,半小時以內使用,一小時也可以,但是效率會隨著時間延長而下降。

處於感受態的細菌細胞有何優點

2樓:匿名使用者

感受態的細胞處於最適攝取和容納外來dna的生理狀態。再者,將構建好的載體轉入感受態細胞進行表達,不僅可以檢驗重組載體是否構建成功,最主要的是感受態細胞作為重組載體的宿主可以進行後續實驗,如蛋白質表達純化等工作。

感受態可以再擴增用來製備感受態嗎

3樓:陽光的天外飛天

方法一: 細菌轉化的方法多以mendel和higa(1970)的發現為基礎,其基本方法是用冰預冷的cacl2或多種2價陽離子等處理細菌,使之進入感受態得以轉化。 用cacl2製備新鮮或冷凍的大腸桿菌感受態細胞,常用於成批製備感受態細菌。

感受態細胞為什麼要放倒-80度儲存

4樓:魔力

您好,感受態細胞收到過點選或者氯化鈣氯化銫等的處理,細胞壁以及細胞膜都有損傷,可以說是十分脆弱的細胞,如果放於-20℃儲存,時間長了細胞內部液化度較高的情況下,細胞會由於流動性的原因造成不可逆損傷,甚至死亡。所以要放於-80攝氏度。

5樓:匿名使用者

首先你要明白,凍存的細胞,溫度越低,儲存的時間越長,像哺乳類細胞凍-80儲存半年沒問題,但你如果要儲存一年以上,還是液氮更可靠

我不能說明為什麼要放-80,但我可以告訴你,放-20,時間一長,感受態轉化活性急劇下降,而且容易死掉。

6樓:匿名使用者

康體生命的感受態細胞都是-80度儲存的,dh5α,dh10β,stbl3,jm109,bl21(de3),top10這些都是包乾冰、包運送的,平均下來一支只要3.5

做好的感受態細胞在-80度能儲存多久呢?

7樓:春野櫻

一般的細胞-80儲存2-3個月,最後不要超過2個月。

8樓:不流淚的兵

hen nan hui da

感受態細菌轉化後在氨苄板上培養12個小時,板上長出菌了,挑菌後搖菌

9樓:愛小腿子

實驗結果不能肯定的說明結果是成功的,做實驗的陰性對照也很重要,陰性對照必須做出陰性結果。如樓下的網友所說,可能是你的感受態菌被質粒汙染了。現在我回答一下你的 追問吧:

「未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出單菌落」,那麼這個長出的單菌落你有沒有做菌落pcr的鑑定?如果你沒有做菌落pcr的鑑定,還有一種可能就是你的板子上的抗生素濃度不夠,導致長出了菌,這個菌到底含不含有你的目的質粒,要做pcr鑑定,不要光看菌落長出與否。建議你把板子的抗生素濃度提高,同時看看未轉化質粒的感受態細胞在同樣的lb上塗板也長出的單菌落的pcr鑑定結果,從而判斷是否僅僅是感受態被質粒汙染了

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