1樓:匿名使用者
用無水乙醇。
沉澱dna.這是實驗中最常用的沉澱dna的方法。乙返嫌和醇的優點是可以任意比和水相混溶。乙醇與核酸。
不會起漏盯任何化學反應。對dna很安全。因此是理想的沉澱劑。
dna溶液是dna以水合狀態穩定存在。當加入乙醇時。乙醇會奪去dna周圍的水分子。
使dna失水而易於聚合。一般實驗中。是加2倍體積的無水乙醇與dna相混合。
其者哪乙醇的最終含量佔67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代無水乙醇(因為無水乙醇的**遠遠比95%乙醇昂貴).但是加95%的乙醇使總體積增大。
而dna在溶液中有一定程度的溶解。因而dna損失也增大。尤其用多次乙醇沉澱時。
就會影響收得率。折中的做法是初次沉澱dna時可用95%乙醇代替無水乙酵。最後的沉澱步驟要使用無水乙醇。
也可以用倍體積的異丙醇。
選擇性沉澱dna.一般在室溫下放置15-30分鐘即可。
2樓:匿名使用者
為了保護dna分子不背破壞。
3樓:匿名使用者
對於乙個生物整體體來說,dna是穩定的遺傳笑局物質,但機體的細胞也在不斷的衰老,死亡和更新換代,期間就包含著核酸的代謝,細胞記憶體在著大量的核酸酶,就能高效的降解dna,正常情況下,細胞內有一種調控機制,不會降解自己的dna,但在細胞受到損傷,病變,或死亡時,細胞就是啟動自己的降解程式,也是生物體的一種自保。
核酸酶在體外適宜的條件也可以降解dna,因此提核酸要在低溫下進行,儘量減少dna的降解。散喊。
現在有的dna提取試衝公升野劑盒,加有核酸酶抑制劑,就可以在常溫下操作。95%的酒精凍乙醇的作用是沉澱dna。
為什麼在dna的粗提取與鑑定中,酒精必須
4樓:水瓶火鍋呀
在dna的粗提取與鑑定中,酒精必須用預冷的95%的酒精,其作用是:
1.抑制核酸水解酶活性,防止dna降解;
2.降低分子運動,易形成沉澱;
3.低溫有利於增加dna柔韌性,減少斷裂。
dna的粗提取中酒精的濃度意義和使用需要注意什麼?
5樓:網友
酒精濃度就兩種,一種無水酒精用來沉澱dna,一種70%酒精用來洗dna。沒什麼特別要注意的,實驗前把酒精預冷能夠促進dna沉澱。
6樓:找乙個人一起走
體積分數95%的酒精。
意義:dna不溶於酒精,蛋白質則溶於酒精。加酒精使dna析出,與蛋白質分離。
注意問題:冷卻的95%酒精,要預冷。
希望對你有幫助~
7樓:匿名使用者
酒精濃度95%,可以把雜質都融入酒精。因為95%酒精可以將血液鹽濃度稀釋到,dna在此時最難溶,最易提。
dna的粗提取與鑑定中各種試劑的作用
8樓:十三貝勒爺
濃度較高的氯化鈉溶液(大概物質的量濃度為2 mol/l )中,核蛋白容易解聚,遊離出dna。而dna在濃度較高的氯化鈉溶液中的溶解度很高,na+與帶負電的dna結合成dna鈉鹽。這時dna在溶液中呈溶解狀態。
加入蒸餾水並且攪拌的方法。蒸餾水對於雞血細胞來說,是一種低滲液體,水分可以大量進入血細胞內,使血細胞破裂。
利用dna在濃度較低的氯化鈉溶液中溶解度小的原理,向含有dna的濃度較高的氯化鈉溶液中加入大量蒸餾水,稀釋氯化鈉溶液,使dna的溶解度下降,而蛋白質的溶解度增高從而使二者分離。
將含有na+的dna溶液,加入到相當於其兩倍體積的體積分數為95%冷酒精溶液中,混勻以後可以使dna沉澱、濃縮,形成含雜質較少的dna絲狀物,懸浮於溶液中。
鑑定 甲基綠。
甲基綠見dna會給它染上綠色。
就可以鑑定出是dna
dna鑑定。用二苯胺在沸水浴中與dna作用出現藍色。
關於dna的粗提取和鑑定的問題
9樓:網友
整個實驗過程中三次用到nacl溶液,第一次是溶解細胞核內dna;第二次是dna粘稠物的再溶解;第三次是dna的鑑定。前兩次濃度均是2mol/l,第三次是。
10樓:愛妹小灰狼
dna提取非常麻煩,我做了一次就不想做第2次了。
加水是加冰水吧,是為了提供低溫環境和起混勻攪拌作用。
加nacl記不清楚了,可能平衡什麼吧。
過濾??我都沒過濾,直接倒掉上清液就好了啊,只是最後一次倒很麻煩,因為前面幾次下面都是固體,很好倒掉,最後一次是一團溶物,容易倒出來,這個是為了把提取出來的脂質物質清除掉,只剩下蛋白質。
每一次提取的是過濾物,濾液不要。
11樓:網友
1、實驗中兩次使用蒸餾水。
第一次,取血細胞液時加蒸餾水,目的是讓血細胞吸水漲破。
第二次是在析出含dna的粘稠物後,目的是稀釋nacl溶液,使dna逐漸析出。
2、加3次nacl,第一次,在溶解核內dna時,加入nacl後充分攪拌,加速染色質中dna與蛋白質的分離,使dna充分遊離並融入nacl中。
第二次在dna粘稠物在溶解時,家nacl是使dna再溶解。
第三次是在dna的鑑定中,目的是溶解dna
3、過濾3次。
第一次在提取血細胞核物質時進行過濾,取得的濾液中含有染色質,而濾出的是細胞膜、核膜和細胞器等的破碎結構。
第二次在濾去含有dna粘稠物只能夠,濾液中含有仍然溶解在nacl中的細胞中的一些成分,如蛋白質等。
第三次在過濾含dna的2mol/l的nacl溶液時,過濾後的濾液中含有dna
這可是純手打的,絕對正確,有不明白的再問我)
dna粗提取時,為什麼將提取的dna先溶解,再加入到冷酒精?而不是直接加入?何必多此一舉呢
12樓:鵝子野心
先溶解再析出、去除上清液和加如酒精都是為了提高得到的dna的純度,其原理分別是某些雜質溶於水(利用溶解度差可以在得到dna的同時使它們依然溶解在水中)、dna密度較高易沉底、某些雜質如dna的組蛋白(與dna一起形成染色體)溶於酒精而dna不溶於酒精。加酒精的目的很簡單,就是去處雜質。
13樓:網友
為了降低實驗誤差,直接加酒精,無法分離蛋白質和dna。
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