1樓：匿名使用者
其原理是首先用dna酶侍粗在雙鏈dna探針。用隨機引物法標記的dna探針或cdna探針比活性顯著高於缺口平移法，且結果較為老明鎮穩定。這種方法尤其適用於真核dna探針，因為槐悉。
基因探針的標記
2樓：血盟孑孑
為了確定探針是否與相應的基因組dna雜交，有必要對探針加以標記，以便在結合部位獲得可識別的訊號，通常採用放射性同位素32p標記探針的某種核苷酸α磷酸基。但近年來已發展了一些用非同位素如生物素-親合素系統。
地高辛配體等作為標記物的方法。非同位素標記的優點是儲存時間較長，而且避免了同位素的汙染。最常用的探針標記法是缺口平移法(nick translation)。
首先用適當濃度的dna酶ⅰ（dnaseⅰ）在探針dna雙鏈上造成缺口，然後再藉助於dna聚合酶ⅰ（dna poly merasⅰ）的5』→3』的外切酶活性，切去帶有5』磷酸的核苷酸；同時又利用該酶的5』→3』聚酶活性，使32p標記的互補核苷酸補入缺口，dna聚合酶ⅰ的這兩種活性的交替作用，使缺口不斷向3』的方向移動，同時dna鏈上的核苷酸不斷為32p標記的核苷酸所取代。
探針的標記也可以採用隨機引物法，即向變性的探針溶液加入6個核苷酸的隨機dna小片段，作為引物，當後者與單鏈dna互補結合後，按鹼基互補原則不斷在其3』oh端新增同位素標記的單核苷酸，這樣也可以獲得比放射性很高的dna探針。
fam 標記rna原理是什麼?
3樓：被和諧掉的小羅
fam是常用的螢光基團，連線在taqman探針的5』末端。
taqman探針是rna
為什麼螢光原位雜交實驗中細胞核非特異性吸附
4樓：
原位雜交(in situ hybridization)也叫原位雜交組化(in situ hybridization histochemistry, ishh)，是一種固相分子雜交的方法，它是用標記的dna或rna為探針，在原位檢測組織或細胞內特定核酸序列的方法。探針的種類按所帶標記物可分為同位素標記探針和非同位素標記探針兩大類。常用的同位素標記物有3h、35s、125i和32p，非同位素標記物中目前最常用的有生物素、地高辛和螢光素三種。
探針的種類按核酸性質不同又可分為dna探針、cdna探針、rna探針和合成寡核苷酸探針。
探針的螢光素標記可以採用直接和間接標記的方法。間接標記是採用生物素標記的dutp(biotin-dutp) 經過缺口平移法進行標記；而直接標記法是將螢光素直接與探針核苷酸的磷酸戊糖骨架共價結合，或在缺口平移法標記探針時將螢光素核苷三磷酸摻入。
原位雜交術可在原位檢測細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達，有很高的敏感性和特異性，已成為細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
螢光原位雜交（fluorescence in situ hybridization, fish）是一種分子細胞遺傳學技術，是20世紀80年代末期發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用於動植物基因組結構研究、染色體結構變異分析、病毒感染分析、人類產前診斷、腫瘤遺傳學和基因組進化研究等許多領域。fish的基本原理是用螢光標記的單鏈核酸為探針，與待檢材料中未知的單鏈核酸進行特異性結合，形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。
可用螢光標記的探針直接與染色體進行雜交從而對基因進行染色體定位。
代表性應用：
1、惡性腫瘤和病毒的診斷及鑑別診斷；
2、細胞和組織的基因表達；
3、完整的原位雜交實驗解決方案。
請問金標法準確嗎，金標法的優點及缺點
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淨現值法是專案投資評價中常用的方法，其主要優點有 考慮了資金時間價值，增強了投資經濟性評價的實用性。系統考慮專案計算期內全部現金流量，體現了流動性與收益性的統一。考慮了投資風險，專案投資風險可以通過提高貼現率加以控制。淨現值法也存在某些缺點，主要有 淨現值是一個絕對數，不能從動態的角度直接反映投資專...