什麼是基因轉染,基因轉染簡介

2024-12-20 02:20:12 字數 3827 閱讀 3676

1樓:網友

基因轉染。基因轉染的定義是「將具生物功能的核酸轉移或運送到細胞內並使核酸在細胞內維持其生物功能」。其中,核酸包括dna(質粒和線性雙鏈dna),反義寡核苷酸及rnai(rna interference)。

基因轉染技術已廣泛應用於基因組功能研究(基因表達調控,基因功能,訊號轉導和藥物篩選研究)和基因**研究。

基因轉染需要一定的轉染試劑將帶有目的基因的載體運送到細胞內。早期的磷酸鈣轉染法轉染效率很低,且對很多細胞株無效,因此不能滿足很多科研工作的需要。目前,最常用的轉染試劑是陽離子脂質體和陽離子聚合物,它們在克服細胞屏障方面跟病毒有很相象的特徵,容易透過細胞膜。

其中,陽離子脂質體在體外基因轉染中有很高的效率,然而在體內,它迅速被血清清除,在肺組織內累積,誘發強烈的抗炎反應,這將導致高水平的毒性,因此,在很大程度上限制了其應永。由於陽離子脂質體的侷限性,陽離子聚合物轉染試劑日益受到重視。

2樓:雲玥嶽雅素

常用的基因轉染技術是將外源基因匯入靶細胞需要一定的載體和匯入方法,基因轉技術則是將純化的含有靶基因的質粒dna 送入細胞內,並在細胞內表達。轉染方法有多種,根據不同的細胞,貼壁或懸浮細所可選用不同的方法,其目的是要達到設定轉染效率,影響轉染產率的因素有多 種,包括轉染方法、操作技術、質粒dna 的純度、靶細胞的生長狀態等,下面重點介紹向幾種常用的轉染技術:被用於作靶基因轉染的細胞,其生長狀態如何,將直接決定了基因轉染效率。

如為貼壁生長的細胞,一般要求在轉染前一日,必需應用胰酶處理成單細胞懸 液,重新接種於培養皿或瓶,細胞密度以鋪滿培養器皿的60%為宜,轉染當日,在轉染前4小時換一將近新鮮培養液。對於懸浮細胞,也需在轉染前4小時換一次 新鮮培養液。

用於轉染的質粒dna 必須無蛋白質,無rna 和其了化學物質的汙染,od260

比值應在以上。應用酚-氯仿抽提法制備的質粒dna 一般難以達到此標準,目前大多采用進口的術提取純化試劑盒。

具體的基因轉染技術有鱗酸鈣介導的轉染法、deae葡聚糖介導轉染法、脂質體介導轉染法及電擊基因轉導塵等。靶基因被匯入細胞後,一般在轉染後48 小時,靶基因即在細胞內表達。根據不同的實驗目的,48小時後即可進行靶基因表達的檢測等實驗。

如若建立穩定的細胞系,則可對靶細胞進行篩選,根據不同基 因載體中所含有的抗性標誌選用相應的藥物,最常用的直核表達基因載體的標誌物有潮黴素(hygromycin)和新黴素(neomycin)。

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基因技術,southern blotting,dna甲基化,基因組學,dna技術,基因轉殖,dna測序。

基因轉染簡介

3樓:夕志畫

1 拼音 2 英文參考。

3 轉染的概念。

4 轉染方法的分類。

化學轉染法。

物理方法。jī yīn zhuǎn rǎn

gene transfection

轉染(transfection)指真核細胞由於外源dna摻入而獲得新的遺傳標誌的過程。

對外源基因轉染方法的要求包括:

轉移效率高,不影響細胞正常生理活動,低毒性,容易使用,重複性好,易獲得穩定轉化子。

根據轉染的機制不同可劃分為化學轉染法和物理轉染法兩大類。

葡聚糖法。deae葡聚是最早應用哺乳動物細胞轉染試劑之一,deae葡聚糖是陽離子多聚物,它與帶負電的核酸結合後接近細胞膜而被攝取,用deae葡聚糖轉染成功地用用於瞬時表達的研究,但用於穩定轉染卻不是十分可靠。

2.磷酸鈣法。

磷酸鈣法是磷酸鈣共沉澱轉染法,因為試劑易取得,**便宜而被廣泛用於瞬時轉染和穩定轉染的研究,先將dna和氯化鈣混合,然後加入到pbs中慢慢形成dna磷酸鈣沉澱,最後把含有沉澱的混懸液加到培養的細胞上,通過細胞胞膜的內吞作用攝入dna。磷酸鈣似乎還通過抑制血清中和細胞內的核酸酶活性而保護外源dna 免受降解。

3.人工脂質體法。

人工脂質體法採用陽離子脂質體,具有較高的轉染效率,不但可以轉染其他化學方法不易轉染的細胞系,而且還能轉染從寡核苷酸到人工酵母染色體不同長度的dna,以及rna,和蛋白質。此外,脂質體體外轉染同時適用於瞬時表達和穩定表達,與以往不同的是脂質體還可以介導dna和rna 轉入動物和人的體內用於基因**。人工合成的陽離子脂質體和帶負電荷的核酸結合後形成複合物,當複合物接近細胞膜時被內吞成為內體進入細胞質,隨後dna 複合物被釋放進入細胞核內,至於dna 是如何穿過核膜的,其機理目前還不十分清楚。。

1.顯微注射顯微注射雖然費力,但是非常有效的將核酸匯入細胞或細胞核的方法。

2.電穿孔。

這種方法常用來製備轉基因動物,但卻不適用於需要大量轉染細胞的研究。電穿孔法常用來轉染如植物園生智體這樣的常規方法不容易轉染的細胞。電穿孔靠脈衝電流在細胞膜上打孔而將核酸匯入細胞內。

匯入的效率與脈衝的強度和持續時間有關係。

3.基因槍法。

什麼叫轉基因

4樓:恨別枉凝眉

一、轉基因是歷純肆什麼?肢轎。

轉基因就是我們現在科學上的基因工程,它與奈米技術和人工智慧並稱為世界三大尖端科技。基因工程又叫做dna重褲臘組技術。簡單點說,就是將一種生物的某種基因提取出來,加以修飾和改造,然後放到另一種生物的細胞內,定向的改造生物體的遺傳性轉。

比如說我們可以把螢火蟲的發光基因提取出來,轉移到蔬菜細胞內,我們就可以獲得可以發光的蔬菜。

二、基因工程的工具。

基因剪刀——限制性核酸內切酶這是一種存在於細菌體內,可以識別特定的dna序列,並在特定的位點將dna分子切開。

基因縫合針——dna連線酶兩種**不同的dna可用dna連線酶將兩個不同的片段「縫合」起來。

基因運輸車——運載體將外源基因送入受體細胞的運輸工具,它需要有無毒無害、自我複製、多酶切點、多標記基因的特點。

什麼叫轉基因

5樓:楊楊

轉基因是什麼意思。

是指將人工分離和修飾過的基因匯入到生物體基因組中,由於匯入基因的表達,引起生物體性狀的改變,是可遺傳的修飾。人們常說的"遺傳工程"、"基因工程"、"遺傳轉化"均為轉基因的同義詞(但如今人們對改變原有動植物性狀的技術稱為轉基因技術(狹義),將對微生物的操作稱為遺傳工程技術(狹義))。

轉基因表達的目標物質主要是蛋白質,人食用後會降解成小分子物質,不會改變人類的基因組成。

對於目前應用較多的抗蟲轉基因作物,有人疑惑,為何蟲子吃了會死,人吃了沒事?專家解釋,我國大規模種植的抗蟲棉轉入了殺蟲蛋白基因bt,這種bt蛋白是一種高度專一的殺蟲蛋白,只針對鱗翅目害蟲,人類和其他生物腸道細胞沒有該蛋白的結合位點,因此是安全的。

我們吃的食品中有多少是轉基因的。

專家表示,我國共批准發放7種轉基因作物安全證書,分別是耐儲存番茄、抗蟲棉花、改變花色矮牽牛、抗病辣椒、抗病毒木瓜、轉植酸酶玉公尺和抗蟲水稻。但實現大規模商業化生產的只有抗蟲棉和抗病毒木瓜。此外,進口用作加工原料的轉基因農產品有大豆、玉公尺、棉花、油菜和甜菜5種,其中轉基因大豆數量最多。

有人說,進口的轉基因大豆除了榨油還加工豆腐、豆漿,專家回應說,進口轉基因大豆是高油大豆,脂肪含量高,蛋白質含量較低,適合榨油而不適合做豆腐,市場銷售的豆腐、豆漿等豆製品是國產非轉基因大豆製作的。推薦:

6樓:中國農業出版社

答:轉基因技術是利用現代生物技術,將人們期望的目標基因,經過人工分離、重組後,匯入並整合到生物體的基因組中,從而改善生物原有的性狀或賦予其新的優良性狀。除了轉入新的外源基因外,還可以通過轉基因技術對生物體基因的加工、敲除、遮蔽等方法改變生物體的遺傳特性,獲得人們希望得到的性狀。

這一技術的主要過程包括外源基因的轉殖、表達載體構建、遺傳轉化體系的建立、遺傳轉化體的篩選、遺傳穩定性分析和回交轉育等。

請問什麼叫轉基因?

7樓:網友

在生物的基因中加入一段,以獲得特定的性狀。

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