第二題中,什麼是目的基因與載體之間的反向連線,為什麼避免這個可以提高重組質粒的比例

2021-04-20 20:50:26 字數 525 閱讀 6093

1樓:匿名使用者

目的基因具有從起始密碼子到終止密碼子的方向性,必須正向連線才能獲得正確克隆,構建的載體才能正確表達目的蛋白。

基因表達載體和重組質粒的區別

2樓:匿名使用者

基因表達載體的構建(即目的基因與運載體結合)是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。

將目的基因與運載體結合的過程,實際上是不同**的dna重新組合的過程。如果以質粒作為運載體,

首先要用一定的限制酶切割質粒,使質粒出現一個缺口,露出黏性末端。然後用同一種限制酶切斷目的基因,使其產生相同的黏性末端(部分限制性內切酶可切割出平末端,擁有相同效果)。將切下的目的基因的片段插入質粒的切口處,首先鹼基互補配對結合,兩個黏性末端吻合在一起,鹼基之間形成氫鍵,再加入適量dna連線酶,催化兩條dna鏈之間形成磷酸二酯鍵,從而將相鄰的脫氧核糖核酸連線起來,形成一個重組dna分子。

這個重組的dna分子也叫重組質粒。

就是這樣。簡單的說,重組質粒是基因表達載體的一種。

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