1樓:二班雙樂
平茹菌種的製作技術:
(一)平茹菌種的分級
平茹菌種是通過人工培育的純菌絲體及其培養基的混合體。生產中通常分為**,即母種(一級種),原種(二級種),栽培種(**種)。
1、母種;利用平茹的子實體經組織分離或孢子分離培育而成,一般盛裝在玻璃試管內。
2、原種:由母種轉擴而成,容器一般選用標準菌種瓶,藥用葡萄糖瓶或其他容器,培養料有棉籽殼、麥粒、玉米粒、玉米芯、木屑等。
3、栽培種:由原種轉擴而成,一瓶原種可以轉擴40-60瓶或20-25袋栽培種。
(二)母種的製作
1、平茹母種培養基的製備;
(1)常用母種培養基配方
a、pp培養基:馬鈴薯(去皮)200克,瓊脂20克,葡萄糖20克,水1000毫升。
b、馬鈴薯綜合培養基:馬鈴薯(去皮)200克,葡萄糖20克,瓊脂20克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,水1000毫升。
(2)母種培養基的製作
a、培養基的配製
將馬鈴薯去皮,稱量200克,切成薄片,放入鍋中,鍋內加水1200毫升,加熱煮沸20分鐘,然後用四層紗布過濾馬鈴薯汁液,在濾夜中加入20克瓊脂,繼續加熱至瓊脂完全溶化,瓊脂完全溶化後,最後加入葡萄糖、磷及二氫鉀、硫酸鎂、蛋白質等物質充分攪拌均勻,補足水分至1000毫升,再用四層紗布濾去雜質。
b、趁熱分裝試管:分裝試管多采用18毫米×18毫米的試管,每管裝入量為試管的1/5。
c、加裝棉塞:棉塞應用較高階的棉花製作,棉塞的大小應與度管相適宜,塞入長度佔棉塞長度的2/3,鬆緊度要適中,即能保證通風,又要防止汙染。
d、扎捆裝鍋:加裝好棉塞的試管用小布裝分裝好,上面用牛皮紙包紮好,用細繩捆緊,豎直放手手提式高壓滅菌鍋的內桶裡。
e、滅菌:用手提高壓鍋高壓滅菌30分鐘。
f、擺斜面:當培養溫度降至60 ℃左右時,及時將試管擺成斜面,將試管逐支擺放在桌子上的細木條上,使培養基的長度為試管總長度的1/2左右,冷卻一天後收起,收時斜面往上防止培養基滑動,斷裂。
2、平茹母種的分離(組織分離法)
(1)種茹選擇:選擇長勢好,茹形完整,色澤適中,剛進入成熟初期的平茹子實體。第
二、三潮出茹高峰期選擇茹體。
(2)種茹的處理與消毒:將挑選好的平茹去掉雜質,放置1-2小時,使茹體失去過多水分,在接種箱內用75%酒精對平茹表面進行消毒。
(3)分離和移接:將分離用的小刀和接種針在酒精燈光焰上灼燒至發紅,冷卻後用小刀把平茹菌蓋切開,在菌褶與菌柄交接處制一田形挑取綠豆塊大小的菌肉組織,迅速放入母種培養基斜面的中間部位。
(4)菌絲培養:將接過平茹組織塊的試管放入25℃左右恆溫培養箱中培養5-7天,挑選菌絲生長健壯,濃密潔白,長勢旺盛,無雜菌汙染的試管,再進行轉接,菌絲滿管後,就得到了所需平茹的母種。
3、平茹母種的轉擴
嚴格挑選所要應用的平茹母種,要求其菌絲潔白,濃密,無雜菌汙染,培養基不失水萎縮,一支原始母種可擴接40-60支母種。
(三)原種的製作
1、培養料的製備
(1)棉子殼培養料
a、棉子殼100千克,麩皮10千克,蔗糖1千克,磷肥1千克,石膏粉1千克。
b、棉子殼100千克,生石灰1千克,石膏粉1千克,加水1.2-1.3倍拌勻。
(2)麥粒培養基:a麥粒100千克,石膏粉2%,麥粒用水浸泡10-12小時,煮熟晾乾後加入輔料拌勻。
2、裝瓶與滅菌
菌種瓶洗淨控幹後裝入適量的培養料,棉子殼培養料裝瓶肩處,表面壓平壓實,將瓶外壁擦試乾淨,麥粒種裝至瓶的1/2或2/3為宜。
高壓滅菌,在0.5兆帕的壓力下保持90-120分鐘,麥炷培養基可適當延長滅菌時間;常壓滅菌,當鍋內溫度達到100℃後,保持10-14小時,製作麥粒菌種時,一般不宜採用常壓滅菌法。
3、接種和培菌
將冷卻的菌種裝放在接種箱內,要轉接的平茹母種及所需接種用具等也要放入接種箱內,先開啟紫外燈殺菌,再用甲醛和高錳酸鉀燻蒸消毒30分鐘後,進行接種。
接種的原種貼上標籤放入培養室進行菌絲培養,在20-26℃的條件下,一般25-35天平茹菌絲就可長滿原種瓶。
(四)栽培種的製作
栽培種可用菌種瓶、塑料袋製作,因塑料袋成本低,使用方便,生產中多用塑料袋製作栽培種。
1、塑料的種類和規格
高壓滅菌多采用聚丙烯塑料袋,常壓滅菌多采用聚乙烯塑料袋。一般規格為寬15-17釐米,長33-35釐米,厚0.04-0.05毫米。
2、培養料的配製
栽培種的培養料與原種基本相同,為了培育出活力旺盛的平茹栽培種,在栽培種培養料中常加入5%的麥麩。
3、裝袋滅菌
培養料拌勻後,將栽好的塑料袋一端摺疊一部分,在另一端裝入培養料,裝至塑料袋剩5釐米左右時,用力將斜面壓平壓實,並將袋口紮好,滅菌方法與原種相同,滅菌時間應比菌種瓶要長些。
4、接種和培菌
在接種箱內採用兩端接種,每瓶原種可擴接栽培種20-25袋,接種好的栽培種及時移至培養室培養,室溫保持20-26℃,30-40天菌絲即可長滿菌袋。
2樓:c5324f5東方之聲
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裡的原料是什麼?怎麼做,用什麼消毒,每棒成本多少
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