2019普陀區一模如圖一為某基因工程中利用的質粒筒

1樓：愛刷_棍哥

（1）在基因工程中常用的工具有三種：一是用作切取目的基因限制酶；二是將目的基因與運載體拼接的dna連線酶；三是作為運載體的質粒．

（2）用同一種限制酶將有目的基因的dna與運載體（質粒）切割，形成相同的黏性末端，經dna連線酶進行拼接形成重組dna，可能有「目的-目的基因」、「目的基因-運載體」、「運載體-運載體」三種，其中有效的（所需要的）重組dna是目的基因-運載體．

（3）圖（一）所示的質粒中含有tctr為四環素（抗生素）抗性基因，拼接形成的3種拼接產物（重組dna）與無任何抗藥性的原核宿主細胞接種到含四環素的培養基中，能生長的原核宿主細胞所含有的拼接產物必需含有四環素抗性基因，即運載體-運載體、目的基因-運載體．

（4）據圖分析，p為啟動子，是rna聚合酶識別和結合的位點；將重組dna匯入動物受體細胞的常用方法是顯微注射法．

（5）在基因工程中，限制酶（限制性內切酶）能識別特定的核苷酸序列，並在特定的位點切割磷酸二酯鍵，即作用於圖（二）的a位置；dna解旋酶作用於氫鍵，即b位置．

故答案為：

（1）限制酶（限制性內切酶） dna連線酶

（2）目的基因-目的基因目的基因-運載體運載體-運載體目的基因-動載體

（3）運載體-運載體目的基因-運載體

（4）p（啟動子）顯微注射法

（5）限制酶（限制性內切酶） dna解旋酶

人工構建的大腸桿菌質粒pbr322是基因工程中應用最廣泛的載體（見圖1）．除標註外，圖中其他英文縮寫表示

2樓：春雲的夢

（1）質粒是雙鏈環狀dna分子；該質粒含有多種限制性核酸內切酶的酶切位點，可以作為多種目的基因的載體．ampr和tetr在基因工程中作為標記基因，用於篩選重組質粒．

（2）①通過基因工程培育能合**胰島素的工程菌時，可先依據氨基酸的排列順序推出信使rna的鹼基序列，再推出dna（基因）的鹼基序列，然後用化學方法人工合成a鏈和b鏈基因的片段．將此基因片段分別與2個不同質粒重組後，再匯入大腸桿菌內．

②大腸桿菌是原核生物，細胞中不會內質網、高爾基體等細胞器，不能對多肽鏈進行加工，因此在大腸桿菌內合成的單獨的a、b兩條多肽鏈沒有生物活性．要直接獲得有活性的轉基因人胰島素，可以選擇真核細胞（如酵母菌）作為受體細胞．

故答案為：

（1）dna 含有多種限制性核酸內切酶的酶切位點作為標記基因

（2）①氨基酸的排列順序信使rna的鹼基 dna（基因）的鹼基不同質粒（2個質粒）

②內質網、高爾基體等細胞器對多肽鏈進行加工真核細胞（酵母菌）