基因敲除後通過基因敲入能證明基因的功能嗎

2021-05-29 11:22:57 字數 411 閱讀 4005

1樓:字染碧亥

轉基因動物(transgenic

animal)

指基因組中整合有外源基因,

並能表達和遺傳的一類動物。轉基因體系打破了自然情況下的種系隔離,使基因能在種系遙遠的機體間流動,

既可加快家畜品種的改良力度,

提高畜產品品質,

又可生產珍稀藥用蛋白.

基因敲除指利用染色體間基因打靶的原理,通過將設計好的打靶載體匯入細胞後,同源臂發生同源重組,從而在基因組的某個特定位點引入預定的突變,獲得基因型發生了改變的動物。可以分為基因敲入和基因敲出:基因敲入即引入新的基因或突變;基因敲出即使某個特定的基因得到破壞,可以用於研究基因的功能。

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你這裡遇到的是做組織特異性敲除小鼠。ggt是gamma glutamyl transpeptidase 即 谷氨醯轉肽酶 這是一種只在腎臟近端小管 proximal tubule 的上皮細胞中表達的酶,ggt cre則表示在cre基因之前加上ggt的啟動子,具有這種cre的小鼠只會在腎臟中表達cre...

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這要具體分復析,如果 制這個基因存在可變剪接,那就看這個基因是否有外顯子 不為三的整倍數的外顯子 是這些轉錄本里共有的,如果是就可以在這個外顯子上設計sgrna,這樣就可以敲除掉這個外顯子和其後的外顯子 因為移碼突變導致的提前翻譯終止 如果沒有這樣的外顯子那就只能在不同的外顯子上設計多條sgrna,...

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你的目的基因兩端加了酶切位點麼?或者目的基因轉錄序列的外側有沒有酶切位點?有的話雙酶切再連線。沒有的話建議你設計帶酶切位點的接頭,然後再連到t載體上去。這樣。你先把含t載體的菌搖起來,提質粒,雙酶切,割膠 酶切片段 小的那一段,就是你要的基因 2301載體你看看有沒有那兩個酶切位點,同尾酶也可以,雙...