1樓:
首先獲得要表達的目的基因,然後選擇合適的載體,把目的基因與載體連線到一起,然後再通過適當的條件進行誘導(可以原核表達或真核表達),最後進行檢測和鑑定
2樓:匿名使用者
dna在細胞核中轉錄為mrna,mrna在核糖體中翻譯為蛋白質
3樓:匿名使用者
一般來說是dna轉錄成相應的rna 然後核糖體沿著rna運動同時翻譯出多肽鏈 多肽鏈經過內建網 高爾基體加工成蛋白質
「基因過表達」的原理步驟和應用是什麼?
4樓:立港娜娜
基因過表達的基本原理是通過人工構建的方式在目的基因上游加入調控元件,使基因可以在人為控制的條件下實現大量轉錄和翻譯,從而實現基因產物的過表達。
基因過表達的步驟是:
1,構建克隆。將目的基因連線在特定的載體上,載體種類依據表達系統差異而不同。在載體上一般含有增強基因轉錄的promoter,不同系統中採用的promoter完全不同
2,將克隆匯入表達細胞中。在大腸桿菌,酵母和哺乳動物細胞中,構建的外源質粒直接匯入細胞即可,這個過程稱為轉化或轉染。對於昆蟲表達系統,構建的質粒還需要先轉座成為桿狀病毒基因組才能用於轉染。
基因過表達的應用:大腸桿菌表達系統,酵母表達系統,昆蟲表達系統,哺乳動物細胞表達系統和體外翻譯系統(無細胞體系)。
基因過表達跟沉默操作步驟一樣嗎
5樓:匿名使用者
顧名思義,基因過表達是將某個基因大量表達的過程。這個過程可以是在基因原本所在的細胞中,也可以是在其它表達系統中進行。其基本原理是通過人工構建的方式在目的基因上游加入調控元件,使基因可以在人為控制的條件下實現大量轉錄和翻譯,從而實現基因產物的過表達。
現在有很多成熟的表達系統用於基因過表達,常用的包括:大腸桿菌表達系統,酵母表達系統,昆蟲表達系統,哺乳動物細胞表達系統和體外翻譯系統(無細胞體系)。雖然這些系統各不相同,但過表達的基本步驟相似。
構建克隆。將目的基因連線在特定的載體上,載體種類依據表達系統差異而不同。在載體上一般含有增強基因轉錄的promoter,不同系統中採用的promoter完全不同。
將克隆匯入表達細胞中。在大腸桿菌,酵母和哺乳動物細胞中,構建的外源質粒直接匯入細胞即可,這個過程稱為轉化或轉染。對於昆蟲表達系統,構建的質粒還需要先轉座成為桿狀病毒基因組才能用於轉染。
基因的表達。在昆蟲和哺乳動物細胞體系中,轉染進入細胞內的外源基因在其上游強啟動子的作用下可以直接過量表達。在大腸桿菌系統中,需要加入額外的誘導劑(常用iptg)誘導表達,酵母系統中有的也需要誘導表達(例如甲醇誘導)。
體外翻譯系統不用細胞,常常在細胞提取物(模擬細胞內環境)中進行基因的過量轉錄和翻譯,其基本步驟中沒有上訴第二步。
基因過表達的目的一般有兩種,一是獲取大量的目的基因產物,二是研究目的基因產物的生物學功能。
過表達可以讓我們得到大量的目的基因產物(一般是蛋白質),用於研究或生產。比如x射線晶體學研究蛋白質三維結構首先就需要過量表達得到目的蛋白。發酵工程製備胰島素,taq酶等蛋白類產品都需要過表達。
為了研究某一個基因產物的功能,可以在體內(一般是在這個基因本來所在的細胞中)將這個基因過表達,檢測細胞的生理學變化。它和基因敲除是研究基因功能的兩個重要手段。
運用中心法則簡要說出基因的表達過程.
6樓:匿名使用者
dna→rna→蛋白質
基因晶片基因表達,基因晶片基因表達
1雙螺結構解釋了諸多遺傳現象,規律如,分離,自由組合的物質基礎2雙螺結構解釋了諸多變異現象,如基因突變的物質基礎3雙螺結構推動了遺傳理論的進展,如以後形成的中心法則理論,蛋白的合成等,它是後來諸多新理論的最根本的基礎 4雙螺結構是基因工程等生物技術應用理論基礎5對於當今人類健康,基因醫療檢查它也是最...
關於基因表達調控的問題,基因表達調控的方式有哪些
從dna到蛋白質的過程叫基因表達 gene expression 對這個過程的調節即為基因表達調控.原核生物大多數基因表達調控是通過操縱子機制實現的。操縱子通常由 2個以上的編碼序列與啟動序列 操縱序列以及其他調節序列在基因組中成簇串聯組成。啟動序列是rna聚合酶結合並起動轉錄的特異dna序列。基因...
真核基因表達調控意義是什麼,基因表達調控的層次及意義?
真核基因組比原核大得多,結構更復雜,含有許多重複序列,基因組的大部分序列不是為蛋白質編碼的,而為蛋白質編碼的基因絕大多數是不連續的。真核生物基本上是採取逐個基因調控表達的形式。真核基因表達調控的環節更多,轉錄前可以有基因的擴增或重排,並涉及染色質結構的改變 基因啟用過程。轉錄後調控的方式也很多,但仍...