反相色譜中流動相的組成對保留時間有何影響

2021-03-19 18:34:40 字數 1107 閱讀 3634

1樓:青梅畫盞幾年寒

通常情況下

bai認為洗脫速du率與流動相中有機zhi溶劑的比例有如下dao關係:

lnk'=a+bm

(k'是洗脫速版率常數權,m代表流動相中有機溶劑所佔的比例),對於有機待測樣品來說,有機溶劑所佔的比例越大洗脫速率越大,保留時間越短(一般對於有機樣品來說a是正值).

高效液相色譜法如果將流動相中甲醇的比例提高,對測樣品的保留時間有何影響

2樓:千葉雅之

一般來說反相色譜中提高甲醇或者乙腈等有機相比例之後,樣品的保留時間會縮短,出峰會提前。

操做液相色譜時影響保留時間的變化的因素有哪些?

3樓:匿名使用者

影響液相色譜保留bai時間的因素:du

1、流動相的比例與zhi

極性。對於不同的dao柱子,分離

版度和保留時間往往都會有權點差別,所以在操作的時候:a、可以適當調整流動相的比列,如甲醇—水(90:10),如分離效果與保留時間延長,可以調整88:

12或者92:8或者95:5等。

b、有時候還需要更換流動相的組成,甲醇就可以換成乙腈,看具體的實際操作而定。

2、柱子與柱溫。不同的柱子保留時間會有所差別,主要是載體的吸附性和固定液的純度不同,但保留時間一般不會相差太大,可以根據對照品或者標準品的保留時間指定。柱溫在hplc操作時,一般就調整到室溫或者30度。

3、流速。流速的大小,液相色譜一般調整在0.8ml/min或者1.0ml/min。

4、進樣量。進樣量大,保留時間往往會延長。

5、輸液系統的壓力,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,保留時間將會縮短。

具體的影響因素還要在實際操作中慢慢考察,經過調整後才可以的到較好的色譜條件。

4樓:匿名使用者

你說的時間變化的問題,可能是柱溫影響的吧,夏天溫度比較高,柱溫箱有時溫度不夠恆定,我最近也是這樣,出峰時間變化有點大

5樓:匿名使用者

柱子本身的性質引數、流動相的比例組成、柱子穩度、流速、進樣量還有一個是系統壓力。

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