1樓：北京索萊寶科技****
如果細胞數量很多，可以不用離心。棄了胰酶之後，直接加完全培養基吹打就可以了。
傳代的目的不就是細胞已經長滿了現有的培養瓶，為了使其有更大的生存空間傳到多個培養瓶裡麼。要是僅僅換液的話細胞會接觸抑制，而且時間長了的話細胞會大量死亡。
如果你是用的胰酶+edta消化的細胞，那麼最好離心2次徹底去除edta，其對細胞的貼壁生長影響很大，因此最好離心1-2次，不要怕麻煩，我細胞傳代每次都離心現在細胞也長的好好的，沒發現對細胞有什麼破壞。
（僅供參考）
貼壁細胞可以用玻璃瓶培養嗎
2樓：北京索萊寶科技****
想要細胞好好貼壁，所使用的玻璃底培養皿進行細胞培養之前，要確認已經包被了特定的蛋白試劑。
自己動手包被
培養不同的細胞，需要的包被試劑也不同。同時，因為用於包被的蛋白是生物產物，所以不同公司的包被蛋白的產品純度和用量都是不同的，本技術帖只是提供參考，具體的包被試劑用量還是要參考所用品牌的說明書。並且最好以自己所用的試劑先做一個梯度實驗，找出最適合的包被濃度。
這裡以 poly-l-lysine 為例：
pll包被適用於絕大多數細胞，尤其適用於中樞系統神經元的培養。在使用時需要使單位面積上的蛋白含量（μg/cm2）達到理想的量。本例中pll推薦包被的用量為 2μg/cm2。
需要根據包被面積，包被體積，來計算所需要蛋白質的量。
比如：35mm玻璃底培養皿，細胞生長面積是3.5cm2，包被面積是4.
1cm2，包被液體積是400μl，那根據推薦用量2μg/cm2。那麼單孔中需要8.2μg的pll，如果只加入400μl的pll溶液，那pll的溶液濃度為20.
5μg/ml（約為 20μg/ml）。所以，需要用超純水將原液進行稀釋。
具體步驟：
1.使用超純水按照1:5稀釋pll原液。
2.在每個35mm玻璃底培養皿中加入400μl的pll稀釋液。
3.室溫孵育1-2小時，吸出pll稀釋液。
4.使用2ml pbs溶液或無血清培養基小心的清洗3次，吸盡清洗液。
5.直接加入細胞懸液進行培養。
為什麼細胞變圓後就不能貼壁生長了貼壁細胞貼壁的原
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準確的說是細胞不貼壁生長後就變圓了.
細胞貼壁的原理是細胞能夠產生粘連分子,來黏附到細胞皿的表面.而當酶處理或細胞皿表面發生變化時,粘連分子被破壞,細胞失去黏附,然後細胞由於表面張力作用就變成球形了.
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